ΔFosB是FosB基因的自然截短型,稳定存在于许多组织中。ΔFosB蛋白与钙在骨和乳腺中的代谢有关,可能调控钙从骨向乳腺转移的信号通路。本研究采用原核表达融合蛋白、蛋白纯化、制备多克隆抗体的方法,制备得到了高滴度的可用于检测ΔFosB蛋白表达的多克隆抗体,为进一步研究ΔFosB在调控钙从骨向乳腺转移的分子机理奠定基础。研究获得以下结果:(1)利用已克隆到的山羊ΔFosB基因构建并鉴定了原核表达载体pET32a-ΔFosB,将其转化到大肠杆菌溶原菌BL21(DE3)pLysS进行表达。(2)优化了原核载体pET32a-ΔFosB在表达菌中的表达条件,发现在37℃,0.5mmol/L IPTG条件下诱导表达6h,目的蛋白将以融合蛋白的形式在表达菌中达到最高表达效率。(3)分别采用了Ni-Agrose亲和柱纯化和切胶纯化的方式,从包涵体裂解液中纯化得到了目的融合蛋白His-ΔFosB。亲和柱纯化法得到的融合蛋白纯度可达90%,但回收得率低于5%。用切胶回收的方法得到的目的条带比较单一,而且回收率比亲和柱纯化法要高得多。(4)用切胶纯化的蛋白免疫家兔得到了效价达到1:51200且对原核表达的融合蛋白His-ΔFosB具有特异性反应的多克隆抗体;用制得的抗体进行western blotting检测山羊体内多个组织中ΔFosB蛋白的表达情况,发现ΔFosB蛋白在山羊的乳腺、骨髓、脑髓、肌肉、心脏、肝和肺等组织中有表达,而在垂体、脾脏中没有表达。