高氏盆炎方一号方对实验性大鼠慢性盆腔炎干预机制研究

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目的通过观察慢性盆腔炎造模大鼠的行为学改变、肉眼观察盆腔大体情况,光镜下观察大鼠子宫组织形态学变化、检测血清IL-10、TGF-β1水平、观察大鼠子宫组织中MMP-2、TGF-β1的表达情况,探讨高氏盆炎方一号方(以下简称高氏一号方)对慢性盆腔炎大鼠(子宫组织)的治疗作用和作用机理。方法将75只12周龄SD雌性大鼠随机分为空白组(10只)和造模组(65只),造模组均采用25%苯酚凝胶0.06ml剂量化学烧伤+机械损伤法制造大鼠慢性盆腔炎疾病模型,造模结束10天后,随机抽取5只大鼠进行盆腔子宫病理学检查,符合盆腔炎病理学表现,提示造模成功,余60只大鼠分为模型组、高氏一号方高、中、低剂量组、中成药蒲苓盆炎康颗粒、西药胎盘组织液肌注组,分别给予高氏一号方高中低剂量(24g、12g、6g/kg,给药20天)和蒲苓盆炎康颗粒(3g/kg,给药20天)灌胃,给予胎盘组织液(1ml/kg,给药20天)肌注,模型组给予生理盐水灌胃,空白组自由食水。观察大鼠的行为学改变、肉眼观察盆腔大体情况、光镜观察大鼠子宫内膜组织形态学变化、检测血清IL-10、TGF-β1水平、大鼠子宫组织中MMP-2、TGF-β1的表达情况。结果1大鼠行为学变化:空白组大鼠,各方面生理机能正常。模型组,造模结束后大鼠逐渐出现精神狂躁,倦怠,皮毛晦暗,脱毛,进食少,阴道分泌物较多,大便稀,褐色,体重较前减轻。各个给药组造模结束后精神状态差,毛发脱落,体重下降,阴道分泌物较多,在逐渐治疗过程中,大鼠精神状态好转,活动较前期增多,阴道分泌物减少,体重逐渐增长,其中高氏一号方高、中剂量组大鼠恢复最为明显。2肉眼观察大鼠子宫组织形态:空白组:双侧子宫外形、色泽正常,无充血、积脓积液、坏死等,与周围组织无粘连;模型组:子宫形态明显肿大,重度充血肿胀,色泽苍白,弹性差,质硬,宫腔粘连、狭窄,宫腔内见大量积液,与周围组织粘连,包裹,部分形成包块;高氏一号方低剂量与蒲苓盆炎康组:子宫形态稍增厚,弹性较低,部分有充血,与周围组织有少许粘连。高氏一号方高、中剂量组和胎盘组与空白组表现类似。3光镜下观察大鼠子宫组织形态学变化:空白组:子宫腔壁结构排列正常,上皮细胞分层未见异常,子宫内膜无明显充血水肿,未见炎性细胞浸润。模型组:子宫腔壁增厚,正常组织结构紊乱,可见大量炎性细胞浸润,腺体弯曲扩张,内膜充血水肿,上皮细胞变性坏死,部分成纤维细胞增生。高氏一号方高、中剂量组和胎盘组与空白组表现类似。高氏一号方低剂量与蒲苓盆炎康组:子宫壁轻度增厚,可见少量炎性细胞轻度浸润,腺体轻度扩张。4子宫组织病理评分:与空白组比较,模型组大鼠宫组织肥染色阳性评分有统计学意义(P<0.05),与模型组比较,高氏一号方治疗组的大鼠子宫组织病理评分均有高度统计学意义(P<0.05);5大鼠肿胀度:模型组与正常组子宫重相比肿胀程度显著(P<0.01),提示盆腔炎模型建立成功。经治疗后,高氏一号方高、中、低剂量组子宫肿胀度与模型组相比明显减轻,差异有统计学意义(P<0.05)。6免疫组化法检测大鼠子宫中MMP-2、TGF-β1的蛋白表达,与空白组比较,模型组大鼠子宫组织TGF-β1表达升高,MMP-2表达降低,有统计学意义差异(P<0.05),高氏一号方髙、中、低剂量组MMP-2的表达升高,TGF-β1表达降低,与模型组比较差异均有统计学意义(P<0.05)。7 ELISA法检测大鼠血清TGF-β1、IL-10水平:模型组大鼠血清IL-10浓度降低,TGF-β1浓度升高,与空白组比较差异有统计学意义(P<0.05),高氏一号方髙、中、低剂量组IL-10的浓度升高,TGF-β1浓度降低,与模型组比较差异均有统计学意义(P<0.05)。8体外抑菌试验结果高氏一号方对金黄色葡萄球菌、乙型溶血性链球菌、大肠杆菌均有不同程度的抑制作用。结论1采用25%苯酚凝胶0.06ml剂量化学烧伤+机械损伤法造模,大鼠的行为学改变、大鼠的子宫、卵巢质量及体重均改变。病理组织大鼠子宫组织子宫腔壁增厚,腔壁结构紊乱,粘连,细胞形态紊乱,可见大量炎性细胞浸润。炎性细胞因子表达异常,大鼠慢性盆腔炎模型制备成功。2高氏一号方可有效治疗慢性盆腔炎,可以较好地起到抗炎,修复损伤组织;其中高氏盆炎方一号方高、中剂量组等效,优于高氏一号方低剂量组,与胎盘组织液组效果相似;高氏盆炎方一号方低剂量组与蒲苓盆炎康颗粒组效果等效。3高氏一号方可调节慢性盆腔炎大鼠前炎症细胞因子,调整组织和血液中各炎性因子的表达,使之趋于正常,从而起到减轻和消除炎症,抑制盆腔粘连的治疗作用。此外高氏一号方可以对金黄色葡萄球菌、乙型溶血性链球菌、大肠杆菌均有不同程度的抑制能力,具有抗炎消菌的作用。图 22 幅;表 7 个;参 83 篇。
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