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脊髓损伤(spinal cord injury, SCI)是临床上常见病多发病,严重的脊髓损伤多发生在青壮年,并且在我国有逐年增加的趋势。脊髓损伤的治疗没有有效的方法。目前治疗的策略主要局限于预防和减少继发损伤及有助于神经恢复或再生的干预调节。实验表明胚胎脊髓移植、细胞(干细胞)移植、转基因细胞移植、基因治疗等使脊髓功能得到了部分恢复,为脊髓损伤的治疗提供了新的治疗方法。尤其是嗅鞘细胞(Ofactory esheathing cell, OECs)移植修复脊髓损伤在实验和临床应用中获得了初步成功,成为有望解决脊髓损伤这一临床世纪难题的重要方法之一。本实验主要探讨了小鼠OECs的分离培养、纯化增殖和鉴定方法,并初步研究了OECs对神经细胞生长的作用,目的是摸索出一套快速、稳定、高效的OECs的培养方法,为研究OECs在治疗SCI作用提供细胞来源和理论基础。实验分别采用4种不同的分离方法进行OECs的分离,获得的细胞悬液在同一条件下进行培养,在第12天时对细胞的数量和形态进行比较和观察。分别采用3种不同的纯化方法对OECs进行纯化,在第12天时对细胞的纯度进行比较。将培养的OECs和背根神经节(dorsal root ganglion,DRG)消化制成细胞悬液,以相同比例接种,接种密度为104/ml ,10天后将联合培养的细胞置于倒置显微镜下进行形态学观察。实验结果显示,采用机械破碎后胰酶消化再经纱网过滤的分离方法分离OECs的效果明显比其它方法好,分离得到OECs数量最多,并且对细胞的形态没有影响;分离培养的OECs成双极或梭形、多突起形和扁圆形油煎蛋形,形态学特征明显;差速贴壁和Ara-c抑制相结合的纯化培养方法兼收了两者的优点,实验证实是一种简单经济而又有实效的OECs培养方法;OECs对被根神经节细胞生长具有促进作用,揭示OECs对SCI的恢复有促进作用,但是还要有进一步的实验来证明。本实验摸索出了一套成熟OECs的分离培养纯化方法,为研究OECs生物学特征以及应用提供了稳定的细胞来源,同时实验结果还显示OECs能够促进其它神经细胞的生长,这为OECs自体移植治疗SCI提供了理论基础。