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本文分为以下两个部分进行探讨：
第一部分抗纤软肝颗粒含药血清对MNNG诱导肝卵圆细胞系WB-F344上皮间质转化的影响
目的：研究抗纤软肝颗粒含药血清（KXRG）对N-甲基-N-硝基-N-亚硝基胍（MNNG）诱导肝卵圆细胞系WB-F344上皮间质转化过程中相关蛋白表达变化的影响。
方法：采用MNNG干预WB-F344细胞系制备肝癌前病变细胞模型，实验组用高、中、低不同浓度抗纤软肝颗粒含药血清（KXRG）刺激细胞，正常组、模型组加等量大鼠空白血清；采用CCK-8法检测细胞的增殖能力，Western blot法检测E-cadherin, N-cadherin, Vimentin蛋白的表达；酶联免疫吸附实验（Elisa）检测细胞上清中甲胎蛋白（AFP）含量。
结果：与正常组比较，模型组细胞OD值、细胞上清中AFP浓度、N-cadherin、Vimentin蛋白表达水平均明显升高（P＜0.05）；而E-cadherin蛋白表达水平降低（P＜0.05）。与模型组相比，含药血清各组细胞OD值、细胞上清中AFP浓度、N-cadherin、Vimentin蛋白表达水平均显著下降（P＜0.05），且含药血清浓度越高，上述指标下降越明显；而E-cadherin蛋白表达水平明显上升（P＜0.05），且含药血清浓度越高，E-cadherin蛋白表达水平上升越明显。
结论：抗纤软肝颗粒含药血清可以抑制大鼠肝卵圆细胞WB-F344细胞的上皮间质转化。
第二部分基于wnt-1/β-catenin信号通路探讨抗纤软肝颗粒调控肝卵圆细胞分化为肝癌细胞的机制
目的:探讨抗纤软肝颗粒含药血清通过 Wnt-1/β-catenin途径抑制肝卵圆细胞向肝癌细胞分化的机制研究。
方法：应用N-甲基-N-硝基-N-亚硝基胍(MNNG)诱导大鼠肝卵圆细胞系WB-F344向肝癌细胞分化。进一步利用质粒上调 Wnt-1的表达。随后采用高、中、低三种浓度的抗纤软肝颗粒含药血清（KXRG）干预细胞模型。流式细胞术检测细胞周期和凋亡率。采用免疫荧光双重染色法检测 Wnt-1和β-catenin的表达。应用流式细胞术检测细胞中角质蛋白（CK19）的表达。采用酶联免疫吸附法(ELISA)检测细胞上清液中甲胎蛋白（AFP）的含量。采用RT-PCR和western blot方法检测细胞中Wnt-1、β-catenin、CyclinD1、C-myc、MMP-7、Axin2和EpCAM的mRNA和蛋白表达水平。
结果：与正常组比较，模型组细胞凋亡率、s期细胞比例、细胞上清液中甲胎蛋白浓度、CK19蛋白水平、Wnt-1、β-catenin、CyclinD1、C-myc、MMP-7、Axin2、EpCAM的mRNA和蛋白表达水平均明显升高。经KXRG干预后，上述指标均显著下降。另外，经Wnt-1过表达质粒干预后，上述指标较模型组有进一步提高。同时，KXRG对Wnt-1上调后的模型细胞上述指标仍有抑制作用。
结论：抗纤软肝颗粒含药血清能够通过 Wnt-1/β-catenin通路抑制肝卵圆细胞向肝癌细胞的分化，对抗纤软肝颗粒的临床应用具有重要的临床指导意义，从而预防肝细胞性肝癌。
第一部分抗纤软肝颗粒含药血清对MNNG诱导肝卵圆细胞系WB-F344上皮间质转化的影响
目的：研究抗纤软肝颗粒含药血清（KXRG）对N-甲基-N-硝基-N-亚硝基胍（MNNG）诱导肝卵圆细胞系WB-F344上皮间质转化过程中相关蛋白表达变化的影响。
方法：采用MNNG干预WB-F344细胞系制备肝癌前病变细胞模型，实验组用高、中、低不同浓度抗纤软肝颗粒含药血清（KXRG）刺激细胞，正常组、模型组加等量大鼠空白血清；采用CCK-8法检测细胞的增殖能力，Western blot法检测E-cadherin, N-cadherin, Vimentin蛋白的表达；酶联免疫吸附实验（Elisa）检测细胞上清中甲胎蛋白（AFP）含量。
结果：与正常组比较，模型组细胞OD值、细胞上清中AFP浓度、N-cadherin、Vimentin蛋白表达水平均明显升高（P＜0.05）；而E-cadherin蛋白表达水平降低（P＜0.05）。与模型组相比，含药血清各组细胞OD值、细胞上清中AFP浓度、N-cadherin、Vimentin蛋白表达水平均显著下降（P＜0.05），且含药血清浓度越高，上述指标下降越明显；而E-cadherin蛋白表达水平明显上升（P＜0.05），且含药血清浓度越高，E-cadherin蛋白表达水平上升越明显。
结论：抗纤软肝颗粒含药血清可以抑制大鼠肝卵圆细胞WB-F344细胞的上皮间质转化。
第二部分基于wnt-1/β-catenin信号通路探讨抗纤软肝颗粒调控肝卵圆细胞分化为肝癌细胞的机制
目的:探讨抗纤软肝颗粒含药血清通过 Wnt-1/β-catenin途径抑制肝卵圆细胞向肝癌细胞分化的机制研究。
方法：应用N-甲基-N-硝基-N-亚硝基胍(MNNG)诱导大鼠肝卵圆细胞系WB-F344向肝癌细胞分化。进一步利用质粒上调 Wnt-1的表达。随后采用高、中、低三种浓度的抗纤软肝颗粒含药血清（KXRG）干预细胞模型。流式细胞术检测细胞周期和凋亡率。采用免疫荧光双重染色法检测 Wnt-1和β-catenin的表达。应用流式细胞术检测细胞中角质蛋白（CK19）的表达。采用酶联免疫吸附法(ELISA)检测细胞上清液中甲胎蛋白（AFP）的含量。采用RT-PCR和western blot方法检测细胞中Wnt-1、β-catenin、CyclinD1、C-myc、MMP-7、Axin2和EpCAM的mRNA和蛋白表达水平。
结果：与正常组比较，模型组细胞凋亡率、s期细胞比例、细胞上清液中甲胎蛋白浓度、CK19蛋白水平、Wnt-1、β-catenin、CyclinD1、C-myc、MMP-7、Axin2、EpCAM的mRNA和蛋白表达水平均明显升高。经KXRG干预后，上述指标均显著下降。另外，经Wnt-1过表达质粒干预后，上述指标较模型组有进一步提高。同时，KXRG对Wnt-1上调后的模型细胞上述指标仍有抑制作用。
结论：抗纤软肝颗粒含药血清能够通过 Wnt-1/β-catenin通路抑制肝卵圆细胞向肝癌细胞的分化，对抗纤软肝颗粒的临床应用具有重要的临床指导意义，从而预防肝细胞性肝癌。