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目的:观察Notch信号通路抑制剂DAPT对胃癌MKN-45细胞自噬信号通路的影响,观察自噬抑制剂CQ对胃癌MKN-45细胞Notch信号通道的影响,初步探讨DAPT联合CQ对胃癌MKN-45细胞增殖、凋亡的影响。方法:将细胞分成4个组:对照组(以不含干预药物的RPMI-1640完全培养基培养)以下简称Control组;CQ组(以含40ummol/L CQ的RPMI-1640完全培养基培养);DAPT组(以含80ummol/L DAPT的RPMI-1640完全培养基培养);联合用药组(以含40ummol/L CQ和80ummol/L DAPT的RPMI-1640完全培养基培养)以下简称Comb组。应用MTT法检测细胞增殖情况,流式细胞仪检测细胞凋亡能力,应用透射电镜、Western Blot、RT-PCR检测细胞自噬水平变化,应用Western Blot检测Notch信号通路表达情况。结果:1、胃癌MKN-45细胞的增殖能力随着DAPT和CQ作用浓度的升高以及作用时间的延长逐渐降低,呈现明显的量效以及时效关系,药物作用24h,DAPT组的细胞增殖能力明显低于Control组,差异有统计学意义(t=17.971,P=0.000),CQ组的细胞增殖能力明显低于Control组,差异有统计学意义(t=27.882,P=0.000),Comb组的细胞增殖能力明显低于DAPT组和CQ组,差异有统计学意义(t=18.514,P=0.000;t=7.185,P=0.002)。2、流式细胞仪见DAPT组凋亡率明显高于Control组,差异有统计学意义(t=12.470,P=0.000),CQ组凋亡率明显高于Control组,差异有统计学意义(t=12.794,P=0.000),Comb组凋亡率明显高于DAPT组和CQ组,差异有统计学意义(t=7.339,P=0.002;t=11.415,P=0.000)。3、透射电镜观察Control组可见少量自噬小体及少量自噬性溶酶体,DAPT组可见较多自噬小体及较多自噬性溶酶体,CQ组可见较多自噬小体及少量自噬性溶酶体,Comb组可见大量自噬小体及少量自噬性溶酶体。4、当DAPT浓度为80ummol/L,作用于胃癌MKN-45细胞24h,Western Blot见自噬相关蛋LC3II相对表达量DAPT组明显高于Control组,差异有统计学意义(t=14.893,P=0.004),P62相对表达量DAPT组明显低于Control组,差异有统计学意义(t=5.290,P=0.006),Beclin1相对表达量DAPT组明显高于Control组,差异有统计学意义(t=6.695,P=0.003);RT-PCR检测ATG7的m RNA相对表达量DAPT组明显高于Control组,差异有统计学意义(t=12.527,P=0.000),ATG12的m RNA相对表达量DAPT组明显高于Control组,差异有统计学意义(t=22.446,P=0.000)。5、当CQ浓度为40ummol/L,作用于胃癌MKN-45细胞24h,Western Blot见Notch信号通道相关蛋Notch1的相对表达量CQ组明显高于Control组,差异有统计学意义(t=11.590,P=0.000),Glut1相对表达量CQ组明显高于Control组,差异有统计学意义(t=8.728,P=0.001)。6、当80ummol/L DAPT联合40ummol/L CQ,作用于胃癌MKN-45细胞24h,Western Blot见自噬相关蛋LC3II相对表达量Comb组明显高于DAPT组和CQ组,差异有统计学意义(t=76.603,P=0.000;t=42.238,P=0.000),P62相对表达量Comb组明显高于DAPT组和CQ组,差异有统计学意义(t=48.765,P=0.000;t=5.837,P=0.004),Beclin1相对表达量Comb组明显低于DAPT组而高于CQ组,差异有统计学意义(t=4.212,P=0.014;t=6.569,P=0.003);RT-PCR见ATG7的m RNA相对表达量Comb组明显低于DAPT组而高于CQ组,差异有统计学意义(t=3.371,P=0.028;t=17.9,P55=0.000),ATG12的m RNA相对表达量Comb组明显低于DAPT组而高于CQ组,差异有统计学意义(t=5.369,P=0.006;t=4.820,P=0.009)。Western Blot见Notch通道相关蛋Notch1相对表达量Comb组明显高于DAPT组而低于CQ组,差异有统计学意义(t=11.936,P=0.000;t=7.779,P=0.001),Glut1相对表达量Comb组明显高于DAPT组而低于CQ组,差异有统计学意义(t=7.507,P=0.002;t=5.335,P=0.006)。结论:1、DAPT可以诱导胃癌MKN-45细胞产生自噬。2、CQ可以诱导胃癌MKN-45细胞Notch信号通路的表达。3、DAPT联合CQ可以使胃癌MKN-45细胞增殖能力下降、凋亡率提高,增强对胃癌细胞的治疗效果。