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目的:主要探讨广西莪术油对血瘀证肝纤维化小鼠TGF-β1/Smads信号通路的影响。方法:（1）用蒸馏法先对广西莪术进行挥发油混合物的提取,再以莪术醇标准品作为对照,通过气相色谱质谱法（GC-MS法）来检测和验证广西莪术油中的主要活性成分。（2）72只SPF级健康雄性昆明小鼠随机性地分成正常组（A组）、血瘀证肝纤维化小鼠模型组（B组）、广西莪术油治疗组（C组）（又分高、中、低剂量组,分别标C1、C2、C3组）、秋水仙碱组（D组）和丹酚酸B组（E组）。B组有12只小鼠,剩下的每组10只。A组常规喂水、饲料。另外的每组小鼠于实验第1天按0.05 m L/100 g剂量皮下注射40%浓度的CCl4+花生油溶剂,后面剩下的注射剂量改变为0.03 m L/100 g,每周注射3次;并从第2周开始按0.5 m L/只剂量尾静脉注射去甲肾上腺素（浓度为0.01 mg/m L）;分别在实验的第1和第10天按50 mg/m L剂量尾静脉注射胎牛血清;此外日常给20%酒精饮水和鸡蛋黄、花生粒等高脂低蛋白+饲料喂养。实验中途（第8、10、11周时）随机每组抽取一只小鼠做病理观察,本次造模共用12周。（3）造模成功后,C1-C3组分别按0.75 mg/100 g、0.5 mg/100 g、0.25 mg/100 g广西莪术油高、中、低剂量每天灌胃1次;D组按0.025 mg/100 g剂量每天灌胃1次;E组按0.25 mg/100 g剂量每天灌胃1次;A组和B组按C1组给药剂量予0.9%NaCl每天灌胃1次。以上除了A组,剩下的每组均在灌胃同时,持续给“40%CCl4+酒精饮水+高脂低蛋白饮食”来维持肝纤维化。共连续灌胃5周。（4）取材前给各小鼠称体重并观察和拍照记录其外观形态特征,评估小鼠中医血瘀证症候表现。随后称取各小鼠肝、脾脏重量,计算肝、脾指数;用HE、Masson染色法观察各肝脏肝纤维化病理情况并评分;用免疫组化法（IHC法）和蛋白质免疫印迹法（Western blot法）观察肝组织TGF-β1、Smad 2及Smad 3蛋白质的表达情况;用实时荧光定量PCR法（RT-PCR法）观察肝组织TGF-β1、Smad 2及Smad 3的mRNA表达情况。结果:（1）气相色谱质谱法（GC-MS）结果:通过计算机软件MassHunter化学工作站共检测出广西莪术油活性成分133种,经过仔细对比共筛选出匹配度大于80%的成分40种。色谱图显示,广西莪术油样品色谱图中不同出峰时间代表不同活性成分。莪术醇标准品出峰时间为28.731 min,并在蒸馏法提取的广西莪术油样品色谱图中发现了与莪术醇标准品出峰时间一致的坡峰,表明广西莪术油中含有莪术醇。（2）血瘀证中医症候外观表现为精神萎靡,反应迟钝,活动困难,毛发粗糙,舌面暗紫,舌下络脉突出显露并超舌底3/4。与A组相比,B组血瘀证中医症候评分显著增高（P<0.01）;C1-C3组、D组和E组分别与B组比较,血瘀证中医症候评分均有不同程度降低（P<0.05或P<0.01）,尤其C1降低最为显著（P<0.01）。且广西莪术油治疗组与阳性药物对照组（D和E组）结果相近。（3）造模和治疗前后,和A组对比,B组体重增加程度明显较低（P<0.01）;C1-C3组、D组和E组分别与B组对比,体重增加程度均有不同程度的上升（P<0.05或P<0.01）,尤其C1组增加的最为显著（P<0.01）。且广西莪术油治疗组与阳性药物对照组（D和E组）结果相近。（4）各组小鼠肝脏大体形态表现:A组肝脏大小较其他组更适中,呈血红色,表面嫩滑,没有颗粒感和结节,柔软且弹性好,边缘完整锐利,无油腻感;B组肝脏较正常组明显增大,颜色发暗无光泽,表面粗糙并布满小结节,颗粒感强,坚硬且无弹性,触之易碎,边缘加厚变钝,少量橘皮样变化,较油腻;C1组肝脏外观形态比较接近正常组,颜色较B组鲜红,表面无或有少量颗粒,弹性尚可;C2组肝脏大小、颜色、质地均与C1组比较相似但表面比C1组光泽度差一些,有少量结节,边缘较韧;C3组肝脏外观形态介于C2组和B组之间,肝体膨胀或缩小,表面欠光滑或有结节,触之较硬,稍有油腻感;D组和E组肝脏与C1组最为相近,有时接近C2组。（5）每组小鼠的肝指数和脾指数结果:和A组作对比,B组小鼠的肝指数和脾指数均显著增高（P<0.01）;C1-C3组、D组和E组分别和B组作对比,每组小鼠的肝指数和脾指数均有不同程度下降（P<0.05或P<0.01）;其中C1组降低最为明显（P<0.01）。且广西莪术油治疗组与阳性药物对照组（D和E组）结果相近。（6）各组小鼠肝组织病理（HE染色和Masson染色）结果:A组肝细胞和肝血窦均围绕中央静脉呈放射状整齐排列,肝小叶结构清晰,汇管区较圆无变大畸形,没有细胞炎性变化、坏死和异常的纤维增生;B组肝细胞和肝血窦排列混乱,肝小叶被异常增生的纤维组织破坏变成假小叶。汇管区有不同程度的变大、畸形改变;C1组病理改变比较接近A组,但偶尔仍可见少量肝细胞坏死和纤维增生;C2组肝细胞结构、大小和坏死情况与C1组比较相似,纤维组织增生更明显,部分汇管区变大、畸形;C3组肝脏病理形态介于C2组和B组之间,肝细胞坏死、变性及纤维增生改变均比较明显和增多;D组和E组肝脏病理变化与C1组最为相近,有时接近C2组。（7）各组小鼠肝组织胶原沉着面积百分比和病理评分结果:与A组比较,B组肝组织胶原沉着面积百分比和病理评分均显著升高（P﹤0.01）;C1-C3、D、E组分别与B组比较,均有明显不同程度的降低（P<0.05或P<0.01）,其中C1组降低程度最为显著（P﹤0.01）。且广西莪术油治疗组与阳性药物对照组（D和E组）结果相近。（8）免疫组化（IHC）结果:TGF-β1、Smad 2和Smad 3的IHC切片在显微镜下的阳性细胞呈黄色或棕黄色,且主要集中在汇管区、纤维间隔区及门脉区。其中TGF-β1、Smad 3阳性表达发生在细胞浆,而Smad 2阳性表达发生在细胞核。同时和A组对比,B组肝组织TGF-β1、Smad 2和Smad 3阳性率评分和蛋白表达半定量分析均明显上升（P﹤0.01）;C1-C3组、D组、E组分别和B组对比,各目的蛋白的阳性率评分和蛋白表达半定量分析均有明显的不同程度下降（P﹤0.05或P﹤0.01）,其中C1组下降最为明显（P﹤0.01）。且广西莪术油治疗组与阳性药物对照组（D和E组）结果相近。（9）Western blot结果:和A组做对比,B组肝脏组织的TGF-β1、Smad 2和Smad 3蛋白质的相对表达量显著增高（P<0.01）;而C1-C3组、D组与E组分别和B组做对比,各目的蛋白的相对表达量均有不同程度降低（P<0.05或P<0.01）;其中C1组降低最为明显（P<0.01）。且广西莪术油治疗组与阳性药物对照组（D和E组）结果相近。（10）RT-PCR结果:和A组做对比,B组肝脏组织TGF-β1、Smad 2和Smad 3的mRNA相对表达程度有明显升高（P<0.01）;C1-C3组、D组和E组分别与B组做对比,各目的基因的相对表达程度均有不同程度下降（P<0.05或P<0.01）;其中C1组下降最为明显（P<0.01）。且广西莪术油治疗组与阳性药物对照组（D和E组）结果相近。结论:（1）广西莪术油成分复杂多样,包括莪术醇、莪术二酮、吉马酮、榄香烯和β-榄香烯等,其抗肝纤维化作用是多种活性成分相互配合,相互约束,相互作用的结果;（2）广西莪术油可有效减轻血瘀证肝纤维化小鼠中医症候表现,增加体重,减轻肝膨胀及减轻肝、脾指数,在一定程度上可改善肝内的纤维化程度;（3）广西莪术油可以经过TGF-β1/Smads信号通路的调控作用,使血瘀证肝纤维化小鼠的肝组织内TGF-β1、Smad 2和Smad 3蛋白质以及基因（mRNA）的表达降低,进而减轻血瘀证肝纤维化小鼠肝组织的纤维化程度。