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本试验用SPA协同凝集的方法对猪链球菌35个参考菌株进行血清学分型的研究,并应用初步建立的SPA协同凝集的方法,结合PCR分型方法和MLST分型方法,对中国部分地区猪链球菌的流行病学进行调查分析,结果如下：猪链球菌35个参考菌株的协同凝集试验：常规方法制备SPA菌悬液,将其依次稀释为100%、80%、50%、40%、30%、10%等几个梯度,血清倍比稀释,血清和SPA菌悬液1:2的比例致敏。凝集试验设立三组对照：致敏SPA和抗原菌液、未致敏SPA和抗原菌液、SPA阴性菌悬液和抗原菌液。结果表明,致敏SPA的最佳工作浓度为50%,30个血清型的抗血清工作浓度介于25～26之间,受试菌株的液体培养浓度在OD值0.55～1.0之间均可出现肉眼可见的凝集颗粒,浓度为OD值0.7左右时,凝集现象最为明显,比较容易分辨。血清20型、31～34型观察到的凝集反应现象较弱,需要做进一步研究。对照组不发生凝集。1、2、7、9分型PCR显示为阳性的菌株,SPA协同凝集试验结果亦为阳性。与裸血清和抗原菌液的反应相比,SPA协同凝集的敏感性得到较大的提高,凝集现象更加明显,易于分辨,更能满足临床检测的需求。中国部分地区猪链球菌的流行病学调查：对来自中国部分地区的370份猪淋巴结、扁桃体、肝脏、脾等组织样品进行细菌分离鉴定,共检出gdh阳性的猪链球菌16株,表观带菌率为4.32%。1、2、7、9分型PCR检出2型6株,7型3株,9型1株,SPA协同凝集检测亦为对应的血清型。应用初步建立的SPA协同凝集的方法对实验室保存的20株猪链球菌进行分型鉴定,共检出1/2型1株,2型4株,后经PCR鉴定亦为均呈2型阳性.检出血清3型2株,4型2株,15型2株,10型、11型、16型各一株,首次在国内检出28型3株,29型1株。MLST分型结果显示,从同一地区分离的两株2型猪链球菌同属ST1型,同时发现一个新的ST型,被MLST数据库收录,命名为ST164。本试验建立的SPA协同凝集方法,结合PCR分子生物学的方法,可以准确区分有交叉凝集反应的菌株,也可以对PCR方法不能定型的菌株做出明确的血清学分型,从而更好地了解猪链球菌各血清型的分布及流行状况,为猪链球菌病的流行病学调查提供有力的工具,同时,也为预防和控制猪链球菌病提供一定的参考依据。