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食管癌(Esophageal Cancer)是一种常见的发生于食管上皮组织的消化道恶性肿瘤,包括鳞癌和腺癌。我国食管癌发病人数居世界首位。食管癌患者在早期多无明显症状,中晚期多采用化疗方式进行治疗。但目前的化疗药物具有选择性低、易产生耐药等缺点,难以满足食管癌临床治疗的需要。分子靶向治疗为食管癌治疗带来了希望,发现新的治疗靶点、寻找新的靶向药物及用药方案,是目前食管癌研究的重要方向。Akt(又称PKB,Protein Kinase B)在食管癌细胞系中以及食管癌组织中都呈现异常的高表达,因此选择临床上的Akt靶向小分子抑制剂MK-2206对于抑制食管癌细胞的生长有着关键的作用。而前期的研究中发现MK-2206对于食管癌鳞癌P53突变株Kyse450和Kyse510抗肿瘤活性较差,这提示其他的机制在影响MK-2206对于两株细胞的敏感性:如内质网应激。因此,本文旨在研究MK-2206对于食管癌细胞内质网应激的影响以及抑制内质网应激通路的激活能否增强MK-2206对Kyse450和Kyse510的敏感性。本论文主要进行如下几个方面的研究:1、采用CCK8法分析MK-2206对食管鳞癌细胞系五株细胞的增殖抑制作用,选定两株耐药性较强的食管癌细胞株作为本论文的主要研究对象。2、采用流式细胞术、Western blot法检测MK-2206对耐药性较强的两株细胞凋亡、周期以及Akt通路的影响。采用Western blot方法检测MK-2206对于内质网应激通路的影响。3、采用干扰RNA干扰XBP1,并且利用IRE1核酸内切酶抑制STF-083010对MK-2206抗肿瘤活性的影响,检测联用STF-083010和MK-2206对于两株食管癌细胞凋亡、细胞自噬、细胞周期和对体内移植瘤的影响,探究作用机制。结果表明:1、MK-2206对于食管癌P53突变细胞株Kyse450和Kyse510抗肿瘤活性较差。不能引起两株食管癌细胞发生凋亡;诱导两株食管癌细胞周期阻滞于G0/G1期;MK-2206能够抑制Akt的激活。2、MK-2206能够引起内质网应激通路之一IRE1/XBP1的激活;IRE1核酸内切酶抑制剂STF-083010与MK-2206联用能显著抑制肿瘤细胞的增殖;增强MK-2206对食管癌细胞诱导的自噬,将肿瘤细胞周期阻滞在G0/G1期,增强P21对周期的调控,但对凋亡无显著影响,联用MK-2206与STF-083010能够引起IRE1蛋白的上调,但STF-083010能够抑制IRE1对XBP1的活化作用,并影响IRE1与Akt蛋白之间的相互作用。3、STF-083010联合MK-2206增强体内抗肿瘤活性,诱导移植瘤细胞发生坏死。结论:抑制IRE1/XBP1通路能够在体内和体外显著的增强MK-2206对食管癌细胞株Kyse450和Kyse510的抗肿瘤活性,诱导细胞自噬,增强P21对于周期的调控作用.