竹鼠肠道中厌氧纤维素降解菌的分离与鉴定

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纤维素占植物干重的33-50%,是世界上分布最广泛、含量最丰富的有机再生资源。分离发现高活力的纤维素降解菌或酶,将会为纤维素在新能源、材料、食品和动物饲料添加剂等行业中的应用提供广阔平台。有关纤维素降解菌的研究报道多分离自林场、土壤、动物粪便、堆肥、废纸浆、温泉和反刍动物瘤胃液等,而对于肠道中的纤维素降解菌的研究报道较少。本实验拟从中华竹鼠肠道中分离具有高活性的、产纤维素酶的厌氧微生物。主要内容及结果如下:对竹鼠肠道中回肠,盲肠,结肠三个部位的纤维降解菌的数量进行检验,发现盲肠部分具有相对较多的厌氧纤维降解菌。试验中运用两种(微晶纤维素和羧甲基纤维素钠)不同成分的培养基进行初筛,后又经纤维二糖多次复筛后,分别筛选出两株相对较理想的厌氧菌种,分别标记为MCC厌氧纤维降解菌和CMC厌氧纤维降解菌。革兰氏染色结果显示,MCC菌和CMC菌染色后均为紫色且为杆状,说明其均为革兰氏阳性杆菌。酶活力测定结果表明,MCC和CMC厌氧纤维降解菌酶活力都为0.142u/mo1。为鉴定两种菌株的种属选择细菌通用引物27F和1492R对其16SrDNA进行扩增测序和系统发育树分析,结果显示MCC菌、CMC菌和Clostridium butyricum即酪酸梭状芽孢杆菌的亲缘关系最近,初步证明两株菌均属于Clostridium属即梭菌属。结论:从竹鼠盲肠中成功分离的MCC和CMC厌氧菌具有较高的纤维降解酶活力,其16SrDNA测序相似比较分析显示其为梭菌属。试验结果为应用酪酸梭状芽孢杆菌药物制剂,提高动物肠道纤维素的利用率,开发绿色粗饲料微生物添加剂的研究提供了理论基础。
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