Survivin蛋白与卵巢肿瘤关系的研究

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目的:(1)研究上皮性卵巢肿瘤组织中Survivin蛋白表达的差异;(2)探讨用不同浓度的TPT(拓扑替康)作用于人卵巢癌细胞株SKOV3后Survivin蛋白的表达差异;(3)探讨用不同浓度的TPT作用于人卵巢癌细胞株SKOV3后SKOV3细胞凋亡及侵袭能力的改变。方法(1)采用组织芯片及免疫组织化学技术,分别检测了正常卵巢组织、良性卵巢肿瘤组织、交界性及恶性卵巢肿瘤组织中Survivin的表达;(2)采用细胞培养技术及免疫细胞化学技术检测TPT对人卵巢癌细胞株SKOV3中Survivin表达的影响;(3)采用细胞培养技术及流式细胞术检测经TPT作用后人卵巢癌细胞株SKOV3增殖和凋亡的改变;(4)采用细胞培养技术、体外侵袭实验及明胶电泳检测经TPT作用后人卵巢癌细胞株SKOV3侵袭能力的改变。结果(1)Survivin蛋白在上皮性卵巢癌、交界性肿瘤中的表达率明显高于良性上皮性卵巢肿瘤及正常卵巢组织(P<0.007),然而上皮性卵巢癌与卵巢交界性肿瘤中Survivin蛋白表达的差异无统计学意义(P=0.267),良性上皮性卵巢肿瘤及正常卵巢组织中Survivin蛋白表达的差异也无统计学意义(P=0.117)。Survivin蛋白的表达与卵巢癌临床病理特征有关,Ⅲ-Ⅳ期表达率(78.4%)明显高于Ⅰ-Ⅱ期(41.2%)(P=0.007),且肿瘤的分化程度越低,Survivin蛋白表达越强(P=0.027),伴有淋巴结转移者(96.7%)明显高于无淋巴结转移者(29.2%)(P<0.001),伴有腹水转移者(94.7%)明显高于无腹水转移者(51.4%)(P<0.001),但与卵巢的组织学类型无关(P=0.977)。(2)免疫细胞化学方法分析显示人卵巢癌细胞株SKOV3中有Survivin蛋白的表达,TPT作用于SKOV3后Survivin蛋白的表达随着TPT浓度的增加而减少,且各组Survivin蛋白表达差异具有统计学意义(P<0.001)。(3)经流式细胞术分析显示,随着TPT作用浓度的增加,SKOV3凋亡率增加,各组差异具有统计学意义(P<0.05)。(4)通过体外侵袭实验及明胶电泳分析显示,随着TPT作用浓度的增加,SKOV3细胞的侵袭率降低,各组SKOV3细胞的侵袭率差异具有统计学意义(P<0.05),并且各组MMP-2,9的表达减少,各组MMP-2,9表达的差异具有统计学意义(P<0.05)。结论(1)Survivin蛋白的表达与卵巢癌的恶性程度有关,恶性程度越高Survivin蛋白的表达越多,Survivin蛋白的表达可能参与卵巢肿瘤的发生、发展过程,故可作为反映卵巢肿瘤生物学行为的有效指标之一;(2)TPT作用于卵巢癌细胞株可以抑制其Survivin蛋白的表达;(3)Survivin是与人卵巢癌细胞株SKOV3的凋亡及侵袭能力有关的因子;(4)TPT可抑制体外人卵巢癌细胞株SKOV3的增殖、促进细胞凋亡,并使其侵袭能力减弱。
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