肿瘤一直是危害人类健康的一大疾病，目前我们还没有非常有效的治疗肿瘤的方法，一些用于治疗肿瘤的药物由于免疫源性强，毒副作用大而效果不理想。寻找高效的抗肿瘤药物一直是抗肿瘤研究的热点。 广泛存在于机体内的核酸酶是一类序列保守，结构稳定，以RNA为底物的蛋白。它们具有的抗肿瘤特性引起了大家的兴趣，特别是由于它们和机体内源性蛋白相似、分子量小，作为抗肿瘤药物，它们具有免疫源性弱、毒副作用小等优点。九十年代在两栖类蛙卵(Rana pipiens)内发现的核酸酶—Onconase的抗肿瘤效果目前在核酸酶家族中是最好的，在体内外试验中，Onconase对一系列肿瘤都有明显的治疗效果，作为抗肿瘤药物有很大的潜力。我们的研究主要是提高Onconase的抗肿瘤特异性，希望构造出特异性抗肿瘤药物。 我们根据大肠杆菌密码子偏好性，合成编码Oncoanse的基因，将Onconase基因通过MscⅠ和SalⅠ酶切位点克隆在pET22b(+)表达载体上，在大肠杆菌BL21(DE3)中以包涵体的形式大量表达重组Onconase。通过包涵体复性，纯化过程最终获得与天然蛋白有一致酶活和肿瘤细胞毒性的重组Onconase。在体外细胞水平上研究重组Onconase对淋巴瘤细胞Hut-78、K562的毒性，并在此基础上，用化学偶联试剂SPDP将重组Onconase和转铁蛋白用二硫键偶联，研究偶联后蛋白对高表达转铁蛋白受体的K562细胞的特异性。我们的研究证明了构建基于Onconase的特异性抗肿瘤蛋白的可行性，为以后开发Onconase的特异性抗肿瘤药物打下了基础。