聚(甲基丙烯酸羟乙酯)支架修复脊髓轻度损伤大鼠模型的研究

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由意外或外伤直接或间接导致的脊髓损伤(SCI)能引起肌肉运动功能、感觉能力丧失,在受损脊柱的相应节段出现各种运动、感觉和括约肌功能障碍。对脊髓的破坏起始于原发性损伤,在随后的几小时或者几天内还有破坏性更强的次级病变发生,即继发性损伤,如炎症反应、氧化损伤、组织水肿等,其中炎症反应是继发性损伤的主要内容,它们使脊髓损伤后的环境更加复杂恶劣。从药物治疗、神经营养因子治疗到干细胞移植治疗,面对脊髓损伤后病情的严重性和环境的复杂性,越来越多的研究者将目光聚焦到组织工程的治疗方法:使用组织工程支架作为支持损伤神经再生的基质,促进和引导神经的再生和修复。聚甲基丙烯酸羟乙酯(pHEMA)支架的弹性、渗透性和含水性良好,有着与天然脊髓组织相似的机械性能,已被证实是支持损伤神经再生修复的良好基质。然而,脊髓继发性损伤的主要内容——炎症反应,和pHEMA支架互相间的作用关系,我们还不十分清楚,而这对支架影响脊髓损伤的恢复至关重要。在本论文中针对大鼠脊髓损伤后的细胞和分子环境,讨论pHEMA支架和早期炎症反应的关系,主要探究支架的植入对巨噬细胞、星形胶质细胞、神经元、神经微丝的影响,分析pHEMA支架为脊髓损伤后早期炎症反应所带来的变化。实验方法:在脊髓白质部位部分横切,造成脊髓白质轻度损伤,然后植入pHEMA支架,建立大鼠白质轻度损伤模型。术后6天和28天灌注动物、提取组织,分别用免疫组化染色和Real-time PCR的方法研究比较早期和晚期免疫炎症反应的不同情况以及pHEMA支架植入后组织修复过程中对细胞和分子环境的影响。研究结果:术后动物无异常表现,6天和28天,在创伤对照组和pHEMA支架植入组中,巨噬细胞均被激活,募集于创伤/支架处,星形胶质细胞在形态和行为上发生变化,但是,术后28天,胶质瘢痕的厚化程度在pHEMA支架植入组中得到了缓解,神经微丝也得到了良好的再生;在炎性因子表达方面,支架的植入对促炎因子没有显著性的影响,而抗炎因子TGF-β1和FGF-1的表达得到上调。结论:pHEMA支架植入减缓了脊髓损伤造成的严重的早期炎症反应,缓解了胶质瘢痕的形成,并且显著促进了抗炎因子TGF-β1和FGF-1的表达及神经微丝的再生,表明pHEMA支架在脊髓损伤之后可抑制不利炎症反应的发生,起到神经保护的作用,并可促进神经的再生和修复。
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