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胰蛋白酶原作为肿瘤相关性蛋白酶原(TAT)在许多肿瘤中有所表达,已经证实在卵巢肿瘤中,TAT的表达与肿瘤恶性度相关,并且与胃癌食道癌结肠癌的侵袭生长和预后复发直接相关。荧光显微技术证明被胰蛋白酶处理过的LNCaP细胞与未经胰蛋白酶处理的细胞比较,表现出丝足和纤维的增加和局部的粘连。这些结构的改变是肿瘤侵袭血管壁后癌细胞生长、转移的主要表现。TAT能直接消化肿瘤周围的细胞外间质蛋白,或者作用于基质金属蛋白酶(MMPS),使之活化,再由MMPS来水解肿瘤周围的细胞外间质[1],为肿瘤的侵袭和扩散创造条件;即TAT的增加与肿瘤并存,并参与肿瘤的恶性化机制。TAT的抑制因子(tumor-associated trypsin inhibitor,TATI)可抑制肿瘤侵袭,能阻止细胞内的酶原活化,与TAT相互作用,并将其逐渐降解[2]。结合TAT能够激活pro-uPA和pro-MMPs等其他蛋白酶,在间接促进肿瘤血管的生成及浸润和转移过程中起到重要作用,我们决定研究TAT在前列腺癌中的表达情况,并通过免疫放射分析法检测分析了PCa和BPH患者血清中TATI的含量情况,对TATI作为PCa标记物,应用于临床做了初步探讨。分析了前列腺癌雄激素全阻断治疗前后TATI的变化及临床意义。本研究应用免疫组织化学、RT-PCT、原位杂交及免疫放射分析等方法检测前列腺癌和前列腺增生组织中TAT及血清中TATI的定性与定量的表达情况。实验结果显示:1. TAT在前列腺癌组织中有异常高表达,表达率90%;在前列腺增生组阳性表达率42.9%,与前列腺癌组比较,两者差异具有统计学意义。(p<0.05)。2.在前列腺癌组中,染色强阳性表达率在Gleason评分大于5分的两组与小于5分的一组比较,表达水平差异有统计学意义(p<0.05),从而说明TAT在恶性程度较高的PCa中有更高表达。3.通过RT-PCR法检测,前列腺癌组织中TATmRNA的表达水平也明显高于前列腺增生组(p<0.05)。4.通过免疫放射分析法检测到血清中TATI的浓度值,结果证实前列腺癌与前列腺增生患者血清中TATI的浓度差别有统计学意义。5. 16例前列腺癌患者血清中TATI含量在雄激素全阻断治疗(诺雷德隔3.6mg ,28天皮下注射1次,每日口服康士得50mg)前后的情况,结果显示治疗三个月后PCa患者血清中TATI明显下降,与治疗前相比有统计学意义,与PSA下降相似。本实验揭示:1.TAT及其抑制因子在前列腺癌细胞组织及血清中有异常表达,不论在mRNA水平还是组织水平。可能因为前列腺癌细胞直接分泌增多有关,作为强效蛋白酶,TAT可激活u-PA,MMPs等其他蛋白酶的活性,促进肿瘤血管形成,参与前列腺癌侵润和转移。2.通过免疫放射分析法检测到前列腺癌及前列腺增生患者血清中TAT的抑制因子TATI的浓度,前列腺癌组比前列腺增生患者组明显增高,是因为肿瘤局部产生还是因为机体的反馈作用有待于进一步研究。3.前列腺癌雄激素全阻断治疗三个月后TATI呈明显下降,可能与治疗后前列腺癌细胞生长受到抑制或凋亡等有关。目前PSA是前列腺癌唯一常用临床监测指标,但经常受到其他因素干扰,随着研究的不断深入,TAT及其抑制因子TATI有希望成为除PSA以外的另一个前列腺癌早期诊断及治疗效果的监测指标;TAT与TATI的相互作用机制,可能成为PCa新的治疗靶点。本研究的主要创新点:1.国内首次报告TAT在前列腺癌中的表达情况及意义,有望为PCa的基础研究和治疗开拓一条新的思路。2.尝试采用免疫放射分析法检测到前列腺癌及前列腺增生患者血清TATI浓度值。对16例前列腺癌患者雄激素全阻断(每4周诺雷德3.6mg和每日康士得50mg)治疗前后血清TATI含量进行对比研究,揭示除PSA外,TATI有可能成为另一个前列腺癌辅助诊断或治疗效果的监测指标。