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本论文主要通过两个试验对反刍动物饲料可利用蛋白质评定技术做了探讨。试验一中,分别用体内法和体外法,测定12种绵羊典型日粮的可利用真蛋白(uTP)、可利用赖氨酸(uLys)和可利用色氨酸(uTrp),研究体内法和体外法的回归关系。确定是否能够通过该回归关系,利用体外法测定的结果,估测体内到达十二指肠的uTP、uLys和uTrp。体内法用3只体重46.00±1.30 kg,装有瘤胃瘘管和T型十二指肠瘘管的成年F1绵羊羯羊(小尾寒羊×无角多赛特)为试验动物,12种日粮粗蛋白(CP)水平递增。12种日粮和3只试验动物4个设计3×3拉丁方试验。每个拉丁方试验分为3个试验期,每期14 d,预饲期7 d,正试期7 d。正试期的前4 d为氮平衡试验,后3 d收集十二指肠食糜。氮平衡试验用全收粪全收尿法。分别用聚乙二醇(PEG,分子量4000)和三氧化二铬(Cr<,2>O<,3>)作为液相和固相指示剂,计算十二指肠食糜流量。通过测定的食糜样品的真蛋白、赖氨酸和色氨酸,根据食糜流量计算体内法到达十二指肠的可利用真蛋白(in vivo-uTP)、可利用赖氨酸(in vivo-uLys)和可利用色氨酸(in vivo-uTrp)。体外法用Zhao和Lebzien(2000)的体外培养技术,测定日粮的可利用真蛋白(in vitro-uTP)、可利用赖氨酸(in vitro-uLys)和可利用色氨酸(in vitro-uTrp)。结果表明,In vitro-uTP (x,%DM)和In vivo-uTP(y,%DM)存在显著的回归关系:y=0.45x+1.23,R<2>=0.87,n=12,P<0.001;食入In vitro-uTP(x,g/d)和In vivo-uTP(x,g/d)均与氮沉积(y,g/d)回归显著(R<2>=0.72,n=12,P<0.001;R<2>=0.69,n=12,P<0.001);In vitro-uLys和In vivo-uLys存在显著的回归关系(R<2>=0.49,P<0.05);In vitro-uTrp和In vivo-uTrp回归关系极显著(R<2>=0.60,P<0.01)。根据以上结果,Zhao和Lebzien(2000)的体外培养技术可以用来估测饲料的In vitro-uTP、In vitro-uLys和In vitro-uTrp;In vivo-uTP可以在测定的In vitro-uTP的基础上,根据回归公式估算,但In vitro-uLys和In vitro-uTrp只能作为In vivo-uLys和In vivo-uTrp的参考。
试验二中,分别测定试验一中的组成日粮的饲料原料的营养组分,计算出12种绵羊典型日粮的CNCPS组分,研究CNCPS蛋白组分和CNCPS碳水化合物组分与试验一中In vivo-uTP、In vitro-uTP、In vitro-uLys、In vitro-uTrp、In vivo-uLys和In vivo-uTrp和氮沉积的回归关系。结果表明,食入的CNCPS蛋白组分(x,g/d),与In vitro-uTP和In vivo-uTP(y,g/d)存在极显著的多元回归关系。可以用食入的CNCPS蛋白组分,根据回归公式估测In vitro-uTP和In vivo-uTP,其回归公式分别为: y=0.55 PA+42.60 PB<,1>-4.23 PB<,2>+2.22 PB<,3>-24.20 PC+208.72,R<2>=0.98,n=12, P<0.0001; y=0.71 PA+22.69 PB<,1>-2.57 PB<,2>+1.33 PB<,3>-9.37 PC+96.02,R<2>=0.92,n=12,P<0.005。
食入CNCPS蛋白组分与氮沉积回归关系不显著(p=0.08>0.05)。
食入的CNCPS蛋白组分(x,g/d),与In vitro-uLys和In vitro-uTrp(y,g/d)存在显著的回归关系(R<2>=0.83,n=12,P<0.05:R<2>=0.84,n=12,P<0.05);而与In vivo-uLys和In vivo-uTrp回归关系不显著。
食入的CNCPS碳水化合物组分(x,g/d),与食入In vitro-uTP(y,g/d)存在极显著的多元回归关系。回归公式为: Y=0.286 CA-0.193 CB<,1>-0.326 CB<,2>-0.603 CC+299.624,R<2>=0.95,n=12,P<0.0001。
食入的CNCPSS碳水化合物组分(X,g/d),与食入In vi著的vo-uTP(y,g/d)存在极显多元回归关系。回归公式为:
y=0.042 CA-0.106 CB<,1>-0.120 CB<,2>-0.208 CC+119.112,R<2>=0.91,n=12,P<0.001。
食入的CNCPS碳水化合物组分(X,g/d),与In vitro-uLys和In vitro-uTrp(y,g/d)存在显著的回归关系(R<2>=0.73,n=12,P<0.03;R<2>=0.73,n=12,P<0.04):但与In vivo-uLys和In vivo-uTrp(y,g/d)回归关系不显著(R<2>=0.65,n=12,P>0.05:R<2>=0.61,n=12,P>0.05)。
这表明,不论CNCPS蛋白组分,还是CNCPS碳水化合物组分,均可以直接用来估测到达十二指肠的可利用真蛋白;而估测的到达小肠的可利用氨基酸则只能作为参考。