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本研究以大豆作为原料,通过含CaCl2的醋酸钠缓冲溶液萃取、离心分离及半透膜透析制备磷脂酶D,并通过分光光度计法对分离出的磷脂酶D进行活力测定。探讨了时间、pH值、温度等因素对从大豆中萃取得到的磷脂酶D活力的影响,通过单因素实验和正交实验确定了磷脂酶D的最佳萃取条件,为磷脂酶D的萃取提供新的技术方法。结果显示酶的最佳萃取条件为:用10倍于大豆粉质量的醋酸钠缓冲溶液萃取,Ca2+浓度为0.005mol/L,温度35℃,pH值4.5,时间20h。并以不同地区不同品种的大豆为原料制备磷脂酶D酶液,通过对其活力的测定,分析得知大豆中磷脂酶D的活性存在一定的地域差异性。将提取的磷脂酶D通过真空冷冻干燥,干燥后的产品以备催化合成磷脂酰丝氨酸(PS)之用。在磷脂酶D催化合成PS的过程中,主要研究了水-有机溶剂两相体系与水相悬浮体系。在以水-有机溶剂两相体系研究中,通过单因素和正交实验得出了最佳的反应条件:缓冲溶液为0.02mol/L醋酸盐的缓冲溶液、底物磷脂的浓度为1mg/mL、丝氨酸的浓度为0.1g/mL、加酶量1.5U/mL、pH值4.5、料液比1:4、反应温度为35℃,可得到磷脂酰丝氨酸的生成率为39.47%,并建立了基本的反应模型;在含有表面活性剂的水相悬浮体系中,主要对不同活性载体体系下的磷脂酰丝氨酸合成得率进行了比较,得出以硅胶吸附磷脂为底物,加入硫酸钙为活性载体的体系合成磷脂酰丝氨酸的得率最高,最佳反应条件为:用硫酸钙作为载体吸附底物,反应时取吸附过的底物浓度为36mg/mL、3.87mol/L的L-丝氨酸、浓度为50mmol/L、pH值4.5的醋酸钠缓冲溶液、1.5U/mL的磷脂酶D在35℃时反应6h,能得到53.2%的磷脂酰丝氨酸产品。本研究还采用柱层析法对已合成出的磷脂酰丝氨酸产品进行了纯化分离,研究了不同流动相、不同流速和不同负载量对磷脂酰丝氨酸分离效果的影响。实验结果表明:以硅胶为吸附介质,氯仿/甲醇(75%/25%)为流动相可获得纯度为65%以上的磷脂酰丝氨酸产品。