Nell-1基因诱导大鼠脊柱后外侧融合的实验研究

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背景:自体骨移植的脊柱后外侧融合是临床上一种常见的脊柱融合方式,但该方法仍然有些尚未解决的问题,比如潜在的供骨区感染和顽固性疼痛,手术时间和术中失血的增加。据估计,单椎体间自体髂骨骨移植脊柱融合的病人中约5%-35%不愈合。即便辅以内固定,仍有10%-15%的脊柱融合病人发生假关节。为了解决这些问题,一些骨移植替代物应运而生,其中应用最为广泛的就是骨形态发生蛋白。它是一种骨诱导能力很强的细胞因子,但经过多年来的研究和临床上的应用,一些学者也发现了BMP一些不理想之处,如异位骨化能力太强,刺激移植区骨过度生长,造成一些相应的并发症。同时BMP生理需要剂量较大,提高了医疗成本。因此,进一步探求更好的骨移植替代物就成为了一种需要。目的:评价以脱钙骨基质(DBM)作为载体由腺病毒介导的Nell-1基因在大鼠脊柱后外侧融合模型中的成骨作用。Nell-1是一种新型的骨诱导蛋白,发现于颅缝早闭的患者中。经过研究分析后认为Nell-1可以导致了骨的成熟,加速了骨的形成。方法:20只Athymic大鼠分为两组,一组植入腺病毒介导的Nell-1基因,另一组植入腺病毒介导的LacZ基因,均以DBM为载体。所有大鼠进行脊柱后外侧融合,于手术后6周被处死。我们分别在2、4、6周时对大鼠进行X线摄片,6周后进行手触力学评定,MicroCT检查和组织学切片观察。结果:6周之后腺病毒介导的AdNell-1基因组的融合率明显高于AdLacZ组。在手触力学评定和MicroCT检查中,AdNell-1组融合率为80%,AdLacZ组融合率为20%;在组织学切片观察中,AdNell-1组融合率为70%,AdLacZ组融合率为20%。骨成熟度的观察中显示AdNell-1组有着更高的骨成熟度。结论:以DBM为载体由腺病毒介导的Nell-1基因可以在大鼠脊柱后外侧形成很好的骨性融合。由于它能够比BMP更加专一地作用于骨细胞分化增殖,Nell-1基因将成为一个很有前景的骨诱导因子。同时本实验也证明了腺病毒作为基因治疗载体系统是十分稳定有效的,而MicoCT作为一种新的评价脊柱融合的方法,可以更准确的获得高质量图像,并根据进行三维重建,精确地评价整个脊柱的骨性结构,值得推广。
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