目的:探讨肉豆蔻木酚素(Macelignan)对M1型小胶质细胞的极化表型及其脂多糖诱导的小胶质细胞条件培养基对神经元活性的调控作用。方法:运用脂多糖(1μg/mL)诱导小胶质细胞过度激活,通过不同浓度的肉豆蔻木酚素(2.5-20μM)干预处理,研究其极化表型及其对神经元活性的调控作用。①运用噻唑蓝(MTT)比色法,检测不同浓度肉豆蔻木酚素(2.5-20μM)对小胶质细胞和神经元活力的影响;②运用Griess法,检测被脂多糖(1μg/mL)激活的小胶质细胞培养基上清中NO的含量变化的影响;③运用荧光染色技术,观察小胶质细胞内iNOS和FoxO3a表达情况以及海马神经元中CyclinD1及p27表达情况;④运用免疫蛋白印迹法,检测被激活的小胶质细胞内p-PI3K、p-Akt、p-FOXO3a、p-mTOR等蛋白表达情况。⑤制备脂多糖激活的小胶质细胞条件培养基,检测Macelignan对鼠性海马神经元生存率、形态学和细胞周期相关蛋白表达的影响。结果:1.MTT法检测结果显示,终浓度为2.5-20μM的肉豆蔻木酚素对小胶质细胞和神经元生存率与对照组无明显差异,表明其对细胞无毒性作用。2.Griess法显示,运用1μg/ml脂多糖处理BV2细胞后,NO释放量与对照组间有显著性差异,P<0.0001;随着肉豆蔻木酚素浓度提高小胶质细胞上清液中NO浓度逐渐降低,与脂多糖组相比较,P<0.001或P<0.05,表明炎症细胞模型的成功及其天然药物的抗炎效能。3.免疫荧光染色和蛋白印迹实验也表明肉豆蔻木酚素可抑制LPS诱导的小胶质BV2细胞的诱导型一氧化氮合酶(iNOS)表达,证明被激活的M1型小胶质细胞的极化表型特征。4.蛋白印迹实验结果表明,肉豆蔻木酚素通过调控Akt、mTOR、Fox03a等蛋白的磷酸化水平,抑制脂多糖所诱导的小胶质细胞炎症反应。5.按1:1比例配制的脂多糖激活的小胶质细胞条件培养基(LPS-MCM)处理鼠性海马神经元HT22细胞结果表明,肉豆蔻木酚素通过调控细胞周期蛋白CyclinD1和p27的表达,抑制了 LPS-MCM诱导的海马神经元HT22细胞的坏死,显示了其很好的神经保护作用。结论:1.肉豆蔻木酚素抑制M1型小胶质细胞介导的神经炎症反应。2.肉豆蔻木酚素可能通过PI3K/Akt通路,调控mTOR和FoxO3a等靶蛋白的活化,抑制神经炎症反应。3.肉豆蔻木酚素可通过抑制内源性神经毒素对神经元的损伤作用。