苦荞活性组分的超临界流体色谱提纯工艺研究

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天然植物苦荞中富含黄酮类化合物芦丁及山奈酚-3-O-芸香糖苷等珍贵活性药物成分,是防治II型糖尿病的食材兼药材,针对传统的苦荞活性组分提纯工艺存在的工序繁琐、能耗高、溶剂残留多及组分变性失活等问题,本课题提出了苦荞活性组分的超临界流体色谱提纯新工艺,主要开展了以下研究工作:首先开展了苦荞活性组分的超临界流体色谱提纯工艺研究,系统考察了夹带剂、CO2流量、温度、压力、以及超载等工艺条件对芦丁及山奈酚-3-O-芸香糖苷两种活性组分的分离效果以及保留行为的影响,确定了适宜工艺条件:CO2流量18 g/min,夹带剂(甲醇-0.2 wt.%磷酸)流量4.5 m L/min,温度318.15 K,压力14 MPa,超载体积20μL,成功制得纯度分别为92.7 wt.%和90.7 wt.%的芦丁及山奈酚-3-O-芸香糖苷产品,收率分别为60.14%及35.85%;确定溶质分子的保留因子与密度及温度的关系符合平均晶格场模型。采用特征点洗脱法测定了芦丁与山奈酚-3-O-芸香糖苷单组分在Zor Bax-CN柱上的吸附平衡数据,其最大吸附量分别为138.81 mg/m L、110.7 mg/m L;并采用Langmuir及Freundlich吸附等温线模型分别对芦丁与山奈酚-3-O-芸香糖苷单组分的实测吸附平衡数据进行了拟合。研究发现,Langmuir吸附等温线模型能较好地描述上述两组分的吸附过程,芦丁与山奈酚-3-O-芸香糖苷单组分在Zor Bax SB-CN柱上的单分子层饱和吸附量范围分别为112.10~211.67 mg/m L、89.27~179.64 mg/m L,并将所测得的单组分Langmuir吸附平衡数据进一步应用于双组分竞争型Langmuir吸附模型中并进行实验验证,结果表明其R2值均大于0.99,拟合效果良好。采用色谱峰扩展法实验测定了芦丁与山奈酚-3-O-芸香糖苷组分在SC-CO2/CH3OH体系中的三元扩散系数,得到在温度308.15~323.15 K及压力8~14MPa的条件下,芦丁与山奈酚-3-O-芸香糖苷的扩散系数分别为(2.02~3.46)×10-8m2/s、(2.02~3.42)×10-8m2/s。在实验基础上,提出了超临界流体-模拟移动床(SF-SMB)连续提纯芦丁及山奈酚-3-O-芸香糖苷组分的新工艺,在四区柱分布(2-2-2-2)型的条件下,采用平衡扩散模型,完成了SF-SMB提纯芦丁及山奈酚-3-O-芸香糖苷过程模拟,确定了适宜切换时间为20 min,萃取液中芦丁组分产品的纯度达到91.71%、收率为96.12%,萃余液中山奈酚-3-O-芸香糖苷产品的纯度达到92.34%,收率为60.76%,与间歇、小批量制备的SFC提纯工艺相比,采用连续的多柱串联模式的SF-SMB分离苦荞活性组分可显著提高产品收率。模拟计算结果满足了主要操作参数及产品分离要求,验证了前期实验工作的可靠性,说明了SF-SMB提纯芦丁及山奈酚-3-O-芸香糖苷组分过程模拟选取的操作模型是合理的。
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