目的：重症急性胰腺炎(SAP)不仅仅是胰腺局部疾病，除了胰腺本身的水肿、出血、坏死，常出现全身性炎症反应综合症(SIRS)并由此引起多器官功能衰竭(MOF)，这正是SAP高死亡率的主要原因。促炎性介质水平升高及抗炎性介质水平下降是SAP病情发展过程中导致SIRS及进一步发生MOF的关键。炎性介质的基因表达为一系列信号转导机制所调控，阻断信号转导通路的某一环节，抑制促炎性介质的产生，有助于减少MOF的发生，减轻SAP的严重程度，降低死亡率。银杏苦内酯B(Ginkgolide B)是从银杏叶中提取的少量萜内酯的一种。它是血小板活化因子(PAF)的特异性拈抗剂，可以竞争性的与PAF受体(PAF receptor PAFR)结合。PAF是参与SAP病情发生发展的重要促炎性介质，其主要生物学效应有促进血小板聚集，促进白细胞趋化、脱颗粒和氧自由基形成，介导其它炎性介质和细胞因子的合成与释放等。PAF的生物学效应是通过与细胞膜上的特异性PAFR结合，激活细胞内多条信号转导途径，包括磷脂酰肌醇信号通路，丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)信号通路中的细胞外信号调节激酶(ERK)、p38MAPK和c-Jun氨基末端激酶(JNK)通路，最终得以实现的。其中p38MAPK信号通路的主要功能是在转录后水平调控促炎细胞因子的基因表达，参与炎症反应过程。已有课题来源：国家自然科学基金，编号 30300465大量体内外实验证明，胰腺炎时p38MAPK活性明显升高，同时伴随多种细胞因子基因表达的上调和血清水平的增高；应用p38MAPK抑制剂进行干预能明显降低血淀粉酶水平，减少白细胞浸润，抑制细胞因子产生，减轻胰腺组织损伤，并且能够提高实验动物的生存率。PAFR属于G蛋白偶联受体(GPCR)家族，GPCR信号通路与蛋白酪氨酸激酶(PTK)信号通路间存在交叉对话作用，所以PTK可能在PAF信号转导过程中发挥作用，但目前尚无相关报道。银杏苦内酯B作为PAF的特异性拮抗剂，用于实验性SAP的治疗已取得良好疗效，但其作用机制尚不明确，对此还缺乏系统的研究。本研究我们用Westem blot和ELISA法检测银杏苦内酯B对SAP大鼠胰腺组织p38MAPK和PTK活性的影响，从信号转导通路水平探讨银杏苦内酯B治疗SAP的分子机制，为国药开发和临床应用提供理论依据。 方法：选用体重220g～250g的健康雄性Wistar大鼠180只，随机分为SAP模型组(SAP)、银杏苦内酯B治疗组(BN)和阴性对照组(NC)，每组又分为lh、2h、3h、6h、12h和24h组，共18组。通过向胆胰管内逆行注射5％牛磺胆酸钠(1mL·kg<-1>)，制备成SAP模型，NC组开腹后仅翻动十二指肠并触摸胰腺数次。术后BN组股静脉注射银杏苦内酯B(5mg·kg<-1>)，NC组和SAP组股静脉注射等量生理盐水。分别在注射5％牛磺胆酸钠后1h、2h、3h、6h、12h和24h处死大鼠，迅速取血及胰腺组织。一部分胰腺组织以中性缓冲甲醛固定，石蜡包埋切片后HE染色制片，观察胰腺组织的病理学改变；另一部分以预冷的生理盐水冲洗后切割成小块，于液氮中速冻过夜，然后转移至-80℃超低温冰箱妥善保存。采用全自动生化分析仪检测血浆淀粉酶。用Westem blot法检测p38MAPK的表达，用Bio-Rad图像处理系统采集X线胶片的条带，用QuamityOne图像分析软件进行条带灰度测定。用ELISA检测PTK活性。所有数据用均数土标准差(x±s)表示，组间差异比较用方差分析，P<0.05为差异有统计学意义。全部统计分析采用SPSS 11.5软件完成。 结果：(1)胆胰管内逆行注射5％牛磺胆酸钠后，各时间点均可见胰腺组织充血、水肿、出血、坏死和血性腹水，并随时间延长胰腺组织病变程度加重、腹水量增多。大鼠SAP模型制备成功。BN组的表现较SAP组轻。NC组基本正常。(2)在各时间点，SAP组和BN组血浆淀粉酶水平均明显高于NC组(P