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酚类化合物为细胞原浆毒物,属高毒性物质。这类物质来源广泛,通常污染水源,毒死鱼虾,危害农作物,并严重威胁人类的健康。含酚有机物的毒性还在于其只能被少数的微生物分解。
从自然界中筛选分离出能够降解特定污染物的高效菌种,有针对性的投加到已有的污水处理系统中的生物强化技术,能够快速提供大量具有特殊作用的微生物,在有毒有害污染物治理中显示出巨大的潜力。
1、本研究从胜利油田河口采油厂的飞雁滩油田土壤样品中分离得到10 株能够利用并降解苯酚的菌株P1-P4、P7、P9-P13。该10 株苯酚降解菌能够在以苯酚为唯一碳源和能源的培养基上生长,经16S rDNA 分子鉴定和生理生化检测,该10 株降酚菌分别被鉴定到属或种。其中降酚菌株P1、P3和P4 这3 株菌株分别属于劳尔氏菌属(Ralstonia)、贪噬菌属(Variovorax)和节杆菌属(Arthrobacter)里的种。其它7 株降酚菌株P2、P7、P9-P13 都属于假单胞菌属(Pseudomonas)里的种。这4个属里的细菌在国内外都已被报道有降解苯酚的特性,其中有关假单胞菌降解环境有机物的报道较多。
2、培养液中的苯酚含量通过4-氨基安替比啉分光光度法测定,通过苯酚降解效率的比较,菌株P2 降解苯酚的能力较其它9 株菌株要强。于是将菌株P2作为本研究中进一步研究的对象,研究了不同的环境条件下该菌株降解苯酚和菌体生长的情况。
3、通过苯酚羟化酶特异性引物的设计,从菌株P2 扩增出苯酚羟化酶大亚基基因,该基因片段编码对苯酚有催化活性的多肽,催化苯酚代谢的第一步反应;表明菌株P2 能降解苯酚是由于细胞具有降解苯酚的遗传基础。