绿鳍马面鲀（Navodon septentrionalis）是我国的重要经济鱼类，本研究以烟台百佳水产公司人工养殖的绿鳍马面鲀为研究对象，对其进行为期一年的周期采样。运用免疫组织化学和性类固醇激素放射免疫测定法，对绿鳍马面鲀的性腺和血清性类固醇激素进行了深入研究和分析，并采用分子生物学方法对绿鳍马面鲀性类固醇激素受体进行了基因克隆与表达分析，得出结果与结论如下：1绿鳍马面鲀性腺的免疫组织化学观察对绿鳍马面鲀进行为期一年的隔月采样。对绿鳍马面鲀性腺中雌激素受体α（ERα）和雄激素受体（AR）进行了定位，发现在卵巢、精巢发育的不同阶段均存在两种受体的不同程度的表达。在卵巢中，ERα在卵母细胞早期发育阶段呈强的免疫阳性反应，而随着卵母细胞的成熟，AR免疫反应逐渐增强，这都说明雌激素及其受体对卵巢发育早期阶段起着关键作用，但雄激素及其受体对卵巢的作用机制尚不明确；精巢中的ERα和AR在精子发生各个时期的间质细胞处均有强阳性反应，在生殖细胞处ERα较AR有更高水平的表达，这说明雌激素及其受体对精巢的发育成熟起到关键作用，雄激素及其受体对生殖细胞的发育、成熟和维持也起着重要作用。2绿鳍马面鲀ERs基因的克隆与时空表达分析本实验首次克隆到绿鳍马面鲀三种ERs基因：ERα cDNA核心序列共1410bp，编码470个氨基酸；ERβ1cDNA全长2192bp，包含一个开放阅读框，编码565个氨基酸；ERβ2cDNA全长2363bp，包含一个开放阅读框，可以编码662个氨基酸。利用生物学软件将绿鳍马面鲀ERs的氨基酸序列与其它硬骨鱼类及哺乳动物等进行多序列比对，发现了ERs的一些共有的结构特点，也发现了绿鳍马面鲀ERs的一些特点。本实验采用RT-PCR方法，检测了ERs在性成熟雌、雄鱼中11种组织中的分布情况，结果表明，绿鳍马面鲀ERs在雌鱼各组织中较雄鱼的表达更广泛，包括一些非生殖组织，如鳃、肾脏和脾脏等都检测到mRNA表达，特别是绿鳍马面鲀ERβ1只在雄鱼性腺组织中检测到表达，其他组织均未检测到表达信号。此外，结合血清E2、T及GSI的周年变化，对ERs在性腺中的周年表达情况进行了分析，发现绿鳍马面鲀ERs与血清E2和GSI都呈现出一定的相关性，这表明E2和ERs可能影响性腺的发育成熟。3绿鳍马面鲀AR基因的克隆与时空表达分析本实验首次克隆到绿鳍马面鲀AR部分基因序列，得到AR cDNA核心序列共769bp，共编码256个氨基酸。利用生物学软件将该片段推导得到的氨基酸序列与其它硬骨鱼类及哺乳动物等进行多序列比对，发现了该序列结构上的一些特点。本实验采用RT-PCR方法，检测了AR基因在性成熟雌、雄鱼11种组织中的分布情况，结果表明，该基因在雄鱼各组织中均有表达，仅在雌鱼的一些组织中检测到表达信号，且在雄鱼各组织中的表达丰度高于雌鱼，并认为AR与ARβ更为接近。此外，结合血清T分析了AR在性腺组织中的周年变化情况，发现该基因的转录水平与繁殖周期和血清T的含量存在密切关系。