【摘 要】
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脑缺血再灌注损伤(Brain ischemia and reperfusion injury,BIRI)是由多种机制参与的由于脑缺血及再灌注导致的病理性过程,其中与活性氧自由基(reactive oxygen species,ROS)
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脑缺血再灌注损伤(Brain ischemia and reperfusion injury,BIRI)是由多种机制参与的由于脑缺血及再灌注导致的病理性过程,其中与活性氧自由基(reactive oxygen species,ROS)有密切关联的氧化压(Oxidative stress)的产生和白细胞介导的炎性反应是导致BIRI的两个基本要素.为了改善天然SOD的理化性质和生物学活性,增强其对BIRI的防治作用,我们采用LWMH对SOD进行化学修饰,在本课题研究中探讨了修饰酶LMWH-SOD的制备、二级结构及其血脑屏障通透性,此外,还研究了沙土鼠脑缺血再灌注过程中LMWH-SOD对于炎性细胞因子TNF-α、IL-1β和IL-6表达的影响.本研究取得的结果和结论主要有:(1)优化了LWMH对SOD的修饰过程,实现了对LMWH-SOD的分级分离,获得了在现有修饰条件下的最优修饰产物LMWH-SOD2.(2)首次运用FTIR技术和CD光谱技术对LMWH-SOD的二级结构进行分析,认为LMWH对SOD的化学修饰增加了酶蛋白分子二级结构中α-螺旋构象,而对构成酶活性中心同时也是分子二级结构中优势构象的β-构象的影响很微弱(β-构象比例稍有下降).(3)首次运用Iodogen放射性碘标记技术探讨了LMWH-SOD透过血脑屏障的能力和在小鼠体内分布情况,证明LMWH-SOD对脑缺血损伤鼠具有一定的血脑屏障透过能力,对正常动物脑组织不具有通透性,同时发现LMWH-SOD具有肾脏分布特异性.(4)首次证明在蒙古沙土鼠脑缺血再灌注模型中,LMWH-SOD对于脑组织中炎性细胞因子TNF-α、IL-1β及IL-6的表达上调有显著的抑制作用,显示了LWMH与SOD生物学功能的同向整合效果.
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