以复乳法制备的多囊脂质体(MVLs)是一种结构特殊的新型脂质体制剂,其不连续的水性囊泡被非同心的类脂以及磷脂膜所分隔,与传统脂质体相比,具有更多的水溶性物质包封容积和较大的粒径。但因其粒径较大,而且同其它传统脂质体一样,稳定性较差,限制了其临床应用。本论文结合脂质体技术和乳化技术,对MVLs制备配方和制备条件进行优化,力图建立一种包封率高、粒径较小、在体外环境中稳定性较高的蛋白质类药物传递系统,并对其进行质量评价。①以牛血清白蛋白(BSA)为模型药物,采用复乳法制备MVLs,考察了配方(模型药物含量、有机溶剂选取、膜材用量、外水相体积),制备条件(乳化方法和乳化时间)对包封率、粒径大小等的影响。研究发现,在单因素实验中,模型药物在含量较少时,药物质量的增加对包封率的影响不显著;氯仿作为油相溶剂与乙醚相比,包封率提高约50.0%;胆固醇(Chol)与卵磷脂(EPC)的摩尔比在1:1时,模型药物的包封率最高,为58.6%;第一次乳化采用先旋涡振荡后水浴超声的方法,与只采用旋涡振荡制得的MVLs相比,包封率提高14.4%。通过正交实验方差分析发现,三油酸甘油酯的含量(TO)、第二次乳化时间以及初乳与外水相的体积比对BSA包封率的影响具有显著性。其中,第二次乳化的时间显著性最大(P<0.05),初乳与外水相的体积比次之(P<0.05),TO与EPC的摩尔比显著性最小(P<0.01)。TO、第二次乳化时间对MVLs粒径的影响显著(P<0.05)。②建立了一种包封率为60%以上、粒径控制在15μm以下的蛋白质类药物传递系统的制备方法,具体步骤如下:将0.5mmol的EPC,0.5mmol的Chol以及0.02mmol的TO,溶解于3mL氯仿中,形成油相,滴加同等体积的溶有模型蛋白BSA(浓度为1 mg/mL)的4.5%(w/v)葡萄糖溶液,旋涡振荡2min并水浴超声60s,形成稳定的W/O型乳液;乳液加入到15mL 4.0%(w/v)的葡萄糖溶液中,旋涡振荡90s,形成复乳,迅速将复乳移至三颈瓶中,水浴加热温度控制在35℃,通入氮气,直至有机溶剂去除。③分别制备了添加维生素E(VitE)、吐温-80(Tween-80)的MVLs,考察此两种物质的加入对MVLs包封率、粒径大小、稳定性以及释放行为的影响。研究发现,在膜材中添加适量VitE,对包封率没有影响,未改变MVLs的形态和释放行为,对粒径分布的影响不明显,但提高了MVLs的抗氧化性。在外水相中加入适量Tween-80,对包封率的影响较小,增大了平均粒径,改善了MVLs粒径分布,提高了MVLs的物理稳定性,没有影响MVLs的释放行为。④制备添加VitE与Tween-80的重组水蛭素多囊脂质体(HV2-MVLs),并对其进行质量评价。质量评价包括性状、形态和粒径检查、包封率、蛋白质结构完整性检查、蛋白质生物活性检测、渗漏率、氧化程度测定、体外释放测定,此八项内容。评价结果显示,添加了VitE与Tween-80采用复乳法制备而成的HV2-MVLs为白色混悬液,有少许沉淀,振摇后重新分散性好;显微镜检查形态为表面不光滑的蜂巢形颗粒(图4.1);平均粒径8.5μm,跨距为0.9,大于15μm的颗粒不超过总数的2%;粒径分布呈正态分布(图4.2);包封率大于50%(表4.5和表4.6);结构和分子量未有明显改变(图4.5和图4.6);生物活性未改变(表4.7);贮存无显著渗漏(表4.8);氧化指数小于0.2,过氧化程度低(表4.9);在37℃体外生理溶液中释放,0.5h内释放量小于1%,可持续释放数日(图4.9)。