人β-防御素-2基因5′-端转录调控区DNA片段的克隆及表达调控分析

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我们将人hBD-2基因上游序列输入Matlnspector软件,于转录因子数据库(http://tansfac.gbf.de/TRANSFAC)中分析,发现-289/-275区域序列(AAATGGTGCAAGAT)与NF-IL6结合元件同源性极高(核心序列1.0,基序0.950同源.)-231/-221区域序列(TGGGGTTTCC)与NF-κB结合元件同源性极高(核心序列1.0,基序0.948同源).参照Internet基因库的hBD-2 cDNA序列(登录号AF071216)及hBD-2基因上游序列计算机分析结果,利用引物设计软件Primer5.0进行引物设计,从中选择最佳引物,并在引物5′-端分别添加绿色荧光蛋白报告基因质粒pEGFP-1多克隆位点中所包含的Xho I与Pst I酶切位点及保护碱基,以SPC-A-1细胞总DNA为模板,扩增hBD-2基因上游的-241/-32片段.
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