胰岛素在大鼠脊髓损伤治疗中的实验研究

来源 :重庆医科大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:papalong2009
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目的:观察胰岛素对大鼠急性脊髓损伤是否具有治疗作用及其可能的作用机理。方法:60只健康的8~10周SD大鼠,体重200~250克,雌雄不限,随机分为A组(损伤对照组)和B组(胰岛素组),每组各30只大鼠,根据改良Allen法,将T8-10椎板全部咬除,暴露硬脊膜,在硬脊膜表面放置一4×3.0mm大小的曲度与脊髓表面弧度相似的铜制垫片,用5g重物在玻璃试管的引导下从8cm高处垂直自由落下,打击垫片,形成致伤力为40gcf,建立中等脊髓损伤模型,B组给与1Iu/kg的胰岛素,一日三次腹腔灌注,连续七天,A组给与等量同次数的生理盐水腹腔灌注,在伤后8h、第3天、第7天、第14天、第28天,用4﹪多聚甲醛灌注固定伤段的脊髓,常规石蜡包埋切片,用Tunel法观察脊髓的细胞凋亡情况,从而了解脊髓的继发损伤的变化,在第1天、第3天、第7天、第14天、第28天采用Nissl染色观察尼氏体和神经元数量的变化,应用免疫组织化学检测脊髓的GAP-43阳性表达的情况,以了解脊髓神经的恢复和生长情况,在动物行为恢复评价方面,我们采用BBB评分标准来评价。结果:B组脊髓神经的尼氏体在脊髓损伤后的崩解及恢复均好于A组,神经元数量在多个时相点也要好于A组(P<0.05或P<0.01),胰岛素能促进脊髓在脊髓损伤后的GAP-43阳性表达,在脊髓损伤后第一天,GAP-43阳性细胞就开始出现,损伤后第七天阳性细胞数达到高峰,以后逐渐下降,而尤其是对照组下降迅速,在第3天,第7天,第14天这三个时间点,胰岛素组较损伤对照组阳性细胞数多且着色深,差异有统计学意义(P<0.05或P<0.01)。脊髓损伤后8h凋亡细胞即出现,在在第7天时,阳性细胞表达达高峰,以后逐渐下降,在第28天时,凋亡的阳性细胞已很少有表达,但在8h、3天、7天、14天时, B组的凋亡细胞明显少于A组,差异有统计学意义(P<0.05或P<0.01)。在动物后肢行为恢复方面,损伤后大鼠的后肢功能在A组及B组均逐渐有恢复,在第3天时,两组BBB得分有差异,B组(胰岛素组)得分大于损伤对照,但无统计学意义,在1周后胰岛素组得分就明显好于损伤对照组(P<0.05),在第2、4周表现得更为明显(P<0.01)。结论:胰岛素能抑制大鼠急性脊髓损伤所致的继发神经细胞凋亡坏死、而且具有促进神经轴突的修复和再生的作用,进而达到在脊髓损伤后保护脊髓神经细胞、促进动物肢体功能恢复的目的。
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