【摘 要】
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目的：初步探讨AGR2介导结直肠癌发展与转移的相关机制。 方法：我们实验室运用CRISPR/Cas9基因敲除技术在结直肠癌细胞系HT29细胞中对AGR2进行了基因敲除（KO），然后在细胞生物学
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目的：初步探讨AGR2介导结直肠癌发展与转移的相关机制。 方法：我们实验室运用CRISPR/Cas9基因敲除技术在结直肠癌细胞系HT29细胞中对AGR2进行了基因敲除（KO），然后在细胞生物学水平运用Transwell迁移实验、细胞黏附实验检测了HT29AGR2-KO细胞迁移能力、黏附能力的变化。基于细胞运动的细胞骨架调节机制，我们使用鬼笔环肽对细胞骨架进行染色来观察细胞外的Agr2蛋白对应力纤维的影响。此外，我们还结合qPCR、Western Blot等分子生物学的方法对Agr2蛋白调控应力纤维的机制进行了初步的研究。 结果：HT29AGR2-KO细胞中应力纤维的完整性被破坏，体外实验也显示细胞的迁移能力、黏附能力显著降低，而加入外源重组Agr2蛋白之后，HT29AGR2-KO细胞的应力纤维、迁移能力均有一定程度的恢复。经研究发现，细胞外的Agr2蛋白可以通过RhoA-ROCK途径调控细胞骨架应力纤维的形成，这种调控作用是通过上调 ROCK2蛋白水平而不影响 mRNA水平来实现的，而蛋白水平的上调可以被放线菌酮抑制。 结论：Agr2蛋白可能通过自分泌或者旁分泌的形式，通过促进结直肠癌细胞中ROCK2 mRNA的翻译上调其蛋白水平，促进应力纤维的形成，从而进一步提高肿瘤细胞的迁移能力。
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