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细菌能通过信息分子的浓度来感知其数量,从而诱发一个从量变到质变的过程,这其中受到群体感应系统(quorum-sensing,简称QS)调节机制的调控。N—乙酰高丝氨酸内酯(N-acyl-homoserine lactones,AHLs),是一类广泛存在的革兰氏阴性细菌群体密度感应系统中的信号分子,参与诱导调控许多植物病原菌致病基因的表达。由aiiA基因编码的AiiA蛋白能降解这类AHLs分子,阻断细菌群体密度感应系统,从而减弱利用QS系统的病原菌的产生的危害。越来越多的研究报道了芽孢杆菌属(Bacillus)中分布有AiiA蛋白。本研究设计一对简并引物aiiAl(5′-ATG ACA GTA AAR AAR CTT TAT TTC-3′)和aiiA2(5′-CTA TAT ATA YTCHGG GAA CRC TYT A-3′),利用PCR检测法初步研究了aiiA基因在枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis,简称Bs)中的分布情况。实验结果表明:有50%左右的检测菌种分布有aiiA基因,本研究首次发现了类似aiiA的基因在Bs的分布。从中选取了来源于Bs-2的aiiA基因进行分子克隆实验,对aiiA基因进行一系列生物信息学分析,此序列与其他在GenBank上登录的序列同源性高达95%,随后通过SWISS-MODEL模拟出它的蛋白三维结构,构建系统进化树。把aiiA-B2基因克隆到pET-29a表达载体中,构建重组质粒pETB2,IPTG诱导后可大量表达目的蛋白。致病性检测表明该BS-2来源的AiiA蛋白不仅能很好地降解OHHL信号分子,而且对胡萝卜欧文氏软腐病菌具有较强的抗病作用。本研究的完成不但有助于了解Bs的防病基因,还为深入了解AiiA蛋白的作用机理奠定基础。