目的:中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白（NGAL;lipocalin-2,siderocalin）是一种小蛋白,表达于中性粒细胞和某些上皮细胞,包括肾小管。肾损伤后NGAL的肾表达显著增加,NGAL释放到尿液和血浆中。NGAL水平在损伤后2小时内升高,使NGAL成为肾损伤早期敏感的生物标志物。目前临床上NGAL检测方法并不多:免疫比浊法操作繁琐、易受干扰;酶联免疫检测耗时耗力,操作繁琐。本研究用磁珠（Magnetic beads）作为固相包被载体,分别用铕螯合荧光微球（Europium（Ⅲ）chelated microparticles,简称 Eu-CMs）和吖啶盐（NSP-DMAE-NHS,简称AE）作为标记物分别建立两种NGAL检测方法。利用磁珠和铕螯合荧光微球旨在建立一种简单、快速、灵敏度高、检测范围广的中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白新型免疫检测方法,文中对建立的检测方法进行优化并对其性能进行了评估;同时本研究探讨用磁珠作为固相载体,吖啶盐作为标记物的化学发光法在检测NGAL的应用。方法:在磁分离时间分辨荧光微球系统中,将一株NGAL单克隆抗体包被在免疫磁珠上;另一株NGAL单克隆抗体标记上铕螯合荧光微球作为荧光信号。运用双抗体夹心法,尿液中的NGAL与包被于免疫磁珠和标记在Eu-CMs的NGAL单抗通过抗原抗体特异性结合形成抗原抗体反应复合物。通过磁分离洗去未结合的剩余物质。无需解离增强步骤,直接通过时间分辨免疫检测仪检测荧光信号。用本研究研制新型免疫检测试剂检测NGAL重组抗原,用OriginPro 8.5分析该方法的标准曲线和分析灵敏度;检测115份临床样本,线性回归法分析该方法与雅培ARCHITECT尿中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白测定试剂盒的相关性。在磁分离化学发光吖啶盐系统中,以NGAL单克隆抗体耦联磁珠作为固相抗体,另一株NGAL单克隆抗体标记吖啶盐作为检测抗体,初步探索了磁分离化学发光检测NGAL重组抗原的相关性能指标。结果:本研究建立了两种基于磁分离的中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白定量检测方法。磁珠铕荧光微球方法的最佳检测时间为60 min,双对数拟合的标准曲线方程为:log（y）=3.187+0.854 log（x）（R2=0.99567）。该检测方法中NGAL检测范围10-1500 ng/ml,分析灵敏度为0.32 ng/ml。批内批间差,特异性,稳定性均良好。同雅培ARCHITECT尿中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白测定试剂盒相比,两种检测方法间的线性相关系数为0.8677（n=115）,两种方法学具有较好的相关性。在磁分离化学发光吖啶盐免疫检测中,拟合标准曲线方程为 log（y）=3.1207+1.0396 log（x）（R2=0.99365）,分析灵敏度为 0.12 ng/ml。结论:本研究中利用磁珠作为固相载体,Eu-CMs作为标记物建立的NGAL检测方法灵敏度高、检测范围宽、精密度好,为临床检测尿液中NGAL提供了一种快速、准确的新型免疫检测方法;同时本研究中的磁分离也可以应用于化学发光吖啶盐免疫检测中,其在NGAL重组抗原的检测中有较高的检测灵敏度,具有良好的性能,为NGAL免疫分析增添了一种实用检测方案。