败育型植物表达载体的构建及功能验证

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败育问题是植物界研究热点之一,在作物常规育种及生产制种方面有着广泛应用,运用败育型植物表达载体遗传转化是引发植物不育的一种快捷策略。本文分别克隆了拟南芥花分生组织及花器官特异基因AP1的启动子和大肠杆菌RNaseH基因的编码区,构建了败育型植物表达载体pHZM13-AP1-RNaseH,并通过电击法将其导入农杆菌EHA105。以烟草C151为受体材料,经农杆菌介导遗传转化,共获得转化株35株。花粉管萌发试验表明,转化株花粉同对照间萌发活力并无差别;称取种子百粒重,转化株平均为6.6mg,对照株平均为9.1mg,表明二者差别显著。进一步电镜扫描种子表面,发现转化株种皮表面褶皱状纹饰减少,成因不明。种子萌发试验表明,转化株种子发率较低,且表现萌发延迟。本研究表明,该败育型植物表达载体极度削弱了宿主植物的育性,但自杀基因并未影响花器发生,这可能同所用启动子在异源表达背景下作用活性改变有关。
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