近年随着中国居民生活生平的提高，慢性高尿酸血症发病率也逐年升高。慢性高尿酸血症导致的肾脏损伤称为尿酸盐性肾病，又叫痛风性肾病，发病机制主要是尿酸及尿酸盐结晶在肾间质沉积，引起炎症反应，并最终导致肾间质纤维化。但其分子机制尚不明确。除此之外，临床上经常见到无症状性高尿酸血症伴发慢性肾损害的现象，并不能确定由传统的尿酸性肾病所致。高尿酸血症是否存在其它致病途径导致慢性肾损害，值得进行相关的研究。目前认为肾小管上皮细胞-间质细胞转分化(EMT)是肾间质纤维化的关键环节之一。而Notch信号通路与EMT的关系近年来也逐渐被认识，有研究表明Notch1可以通过上调Snail诱导EMT，进而调控心瓣膜的发育，另外有研究发现激活Notch1通路可以诱导肾近端小管上皮细胞（PTECs）发生EMT。在肾病动物模型及慢性肾脏病患者肾组织标本中均证实Notch1信号通路与肾间质纤维化明显相关。本文旨在探讨尿酸钠结晶（MSU）能否诱导EMT，并且探讨Notch信号通路在此过程中的调控作用。从而为研究尿酸盐性肾病的发病机制提供新线索。　　目的：　　1.探讨MSU对大鼠肾小管上皮细胞（NRK-52E）EMT的影响。　　2.探讨Notch信号通路在MSU诱导NRK-52E细胞EMT过程中的作用。　　方法：　　1.细胞培养NRK-52E细胞用含10%FBS的DMEM/F12培养基常规培养传代，实验前以无血清的DMEM/F12培养基同步化24小时。　　2.实验分组实验分为正常对照组、MSU刺激组（MSU500μg/ml刺激24h、48h、72h）以及DAPT干预组（MSU500μg/ml+DAPT10μmol/l刺激24h、48h、72h）。　　3.MTT法观察MSU对NRK-52E细胞活性的影响；　　4.倒置相差显微镜观察MSU对NRK-52E细胞形态的影响；　　5.RTq-PCR法检测Jagged1、Notch1、E-cadherin、α-SMA、Snail mRNA表达。　　6.Western blotting检测Jagged1、Notch1、E-cadherin、α-SMA蛋白的表达。　　7.统计分析实验数据。　　结果：　　1.MTT检测MSU对细胞活力的影响　　1.1不同浓度MSU（100μg/ml，300μg/ml，500μg/ml，700μg/ml）刺激NRK-52E细胞24h，细胞活性分别下降至正常对照组的89.13±7.7%；85.60±12%；69.79±8.34%；47.82±14%，（P＜0.05）；　　1.2MSU（500μg/ml）刺激NRK-52E细胞24h、48h、72h，细胞活性分别降至正常对照组的69.79±8.34%；66.43±10.15%；65.73±10.05%，（P＜0.05）。　　2.MSU对细胞形态改变的影响　　2.1空白对照组NRK-52E细胞在培养板中呈圆形或卵圆形，细胞之间紧密相连，具有典型的上皮细胞铺路石样形态学特征，各时相细胞形态无明显改变。　　2.2与空白对照组相比，MSU刺激NRK-52E细胞24h后，细胞形态未见明显改变；刺激48h后，细胞肥大，逐渐失去典型的铺路石样形态；刺激72h后，细胞变长呈梭形，转变为成纤维细胞形态。　　3.MSU对NRK-52E细胞转分化标志物的影响：RTq-PCR结果显示，MSU可显著下调E-cadherin mRNA的表达，MSU刺激48h后E-cadherin mRNA的表达较之正常组细胞下调了58.30±43.48%（P＜0.05）。而经MSU刺激后，α-SMA的mRNA表达则逐渐上调，MSU刺激48h后α-SMA的mRNA表达较之正常组增加了4.90±1.03倍（P＜0.05）；Western blotting得到相同结果，MSU下调E-cadherin蛋白表达的同时可显著上调α-SMA蛋白的表达。　　4.MSU对NRK-52E细胞Notch信号通路相关因子的影响：RTq-PCR结果显示，MSU能明显诱导Snail、Notch1、Jagged1mRNA的表达。MSU刺激48h后Snail、Notch1、Jagged1的mRNA表达量较之正常组细胞分别增加了199.05±35.04%、65.29±60.94%和52.31±50.88%，（P＜0.05）；Western blotting结果显示，MSU刺激48h后Jagged1和Notch1蛋白表达量是正常组细胞的3.68±0.35倍和6.11±1.12倍，（P＜0.05）。　　5.DAPT对MSU诱导的NRK-52E细胞转分化的影响：光镜下可见，DAPT能抑制MSU诱导的细胞形态变化，同时，DAPT能显著抑制由MSU诱导的E-cadherin下调，与MSU48h组相比，DAPT干预48h组的E-cadherin mRNA和蛋白表达量是MSU48h组的5.31±3.41倍和1.49±0.09倍，（P＜0.05）；除此外，DAPT还可抑制MSU诱导的α-SMA的表达上调，DAPT干预48h组的α-SMA mRNA和蛋白表达量分别是MSU48h组的6.10±1.97%和86.81±7.56%，（P＜0.05）。　　6.DAPT对MSU诱导的Notch信号通路的影响：RTq-PCR结果显示，DAPT能明显抑制MSU诱导的Snail(Notch信号通路下游靶因子)mRNA的表达，72h的抑制率达到74.00±8.36%（P＜0.05）。DAPT在抑制γ分泌酶活性，阻断Notch胞外片段剪切这一关键环节后，能同时下调上游的Jagged1和Notch1的表达，DAPT干预48h后Jagged1和Notch1的mRNA下调了56.95±20.43%和50.19±22.41%，（P＜0.05）。Western blotting也得出相同的结果，DAPT干预48h后Jagged1和Notch1的蛋白表达分别下调了56.69±11.32%和38.30±7.50%，（P＜0.05）。　　结论：　　1.MSU可诱导NRK-52E细胞发生EMT。　　2.Notch信号通路在MSU诱导的NRK-52E细胞EMT中具有重要的调控作用。