诱发电位评价细胞移植治疗大鼠脊髓损伤效果的研究

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目的:观察运动诱发电位(motor evoked potentials MEP)和感觉诱发电位(sensoryevoked potentials SEP)在评价雪旺细胞(Schwann cell s,SCs)与嗅鞘细胞(olfactoryensheathing cells,OECs)联合移植修复SCI大鼠效果中的作用,并进行诱发电位与大鼠后肢运动功能BBB评分相关性分析,以寻找客观、可靠、定量的评价细胞移植治疗SCI大鼠效果的方法,判定雪旺细胞与嗅鞘细胞联合移植治疗SCI大鼠的效果。方法:1将48只SD大鼠随机分为损伤对照组(A组)、实验对照组(B组)及雪旺细胞与嗅鞘细胞联合移植组(C组),每组16只。2用NYU脊髓打击器,以25mm高度落下打击T9脊髓造成大鼠中度损伤模型,细胞移植组接受细胞移植,方法为:将Hoechst标记的浓度为50,000/ul的SCs和OECs悬液分别于脊髓损伤3、4、5、6周时移植到脊髓远近断端距离挫伤区边缘1mm的脊髓中线上,深度分别为1.75mm、1.5mm、1.0mm、0.5mm处,注入细胞悬液各1ul左右,注入后留针5分钟。实验对照组在相同部位注入相同剂量无血清的DF-12培养液;损伤对照组不进行干预。3从SCs和OECs联合移植组随机选取8只大鼠,分为环孢素注射组和对照组,每组4只,环孢素注射组自移植前一天开始皮下注射环孢素注射液每天一次,每次10mg/Kg,直到取材,对照组注射相同剂量生理盐水。4观察指标:1)诱发电位:记录脊髓损伤前,损伤即刻,移植前及取材前的SEP及MEP的潜伏期与波幅的变化情况。2)后肢运动功能BBB评分:于脊髓损伤后2天、移植无血清DF-12培养液后2天及SCs和OECs联合移植后2天进行一次BBB运动功能评分,以后每周进行一次,直到取材。结果:1各组动物在脊髓损伤(spinal cord injury,SCI)后即刻SEP、MEP的潜伏期明显延长,波幅明显降低。伤后即刻各组SEP、MEP的潜伏期和波幅的值分别是A组潜伏期(13.1±7.62)ms,波幅(0.9±0.23)uV,B组潜伏期(11.8±1.70)ms,波幅(0.9±0.12)uV,C组潜伏期(6.6±1.20)ms,波幅(0.9±0.11)uV。2伤后6~12周发现SCs和OECs联合移植组的BBB评分较实验对照组明显提高(P<0.01),伤后12周SCs和OECs联合移植组的BBB评分与损伤对照组比较未见明显提高(P>0.05),其值分别是损伤对照组为(12.0±0.63)分,SCs和OECs联合移植组为(12.2±0.81)分。3伤后15周SCs和OECs联合移植组SEP和骨MEP与损伤对照组比较不具有显著性差异(P>0.05),与实验对照组比较有恢复(P<0.01)。其值分别为损伤对照组SEP的潜伏期为(5.0±0.42)ms,波幅为(1.8±0.18)uV;实验对照组SEP的潜伏期为(8.1±1.51)ms,波幅为(1.5±0.10)uV:SCs和OECs联合移植组SEP的潜伏期为(4.2±0.79)ms,波幅为(2.0±0.29)uV:损伤对照组MEP潜伏期为(4.5±1.01)ms,波幅为(11.9±1.65)uV;实验对照组MEP潜伏期为(6.3±1.72)ms,波幅为(10.3±1.27)uV;SCs和OECs联合移植组MEP潜伏期为(3.8±0.50)ms,波幅为(12.5±1.47)uV。4伤后3周进行SCs和OECs移植比6周移植恢复的明显;伤后3周SEP的潜伏期为(2.2±0.19)ms,波幅为(2.3±0.19)uV,伤后3周MEP的潜伏期为(2.2±0.29)ms,波幅为(17.1±0.68)uV。在SCs和OECs移植前后进行免疫抑制治疗,脊髓损伤大鼠恢复的较为明显;取材前,用免疫抑制治疗SEP的潜伏期为(3.0±0.71)ms,波幅为(2.1±0.62)uV,MEP的潜伏期为(2.4±0.67)ms,波幅为(15.2±2.33)uV。结论:诱发电位及BBB评分的检查结果显示,SCs和OECs联合移植对SCI后大鼠的后肢运动功能及神经传导功能的恢复有一定的作用。早期进行SCs和OECs移植对于脊髓损伤大鼠的功能恢复较为明显,细胞移植前后进行免疫抑制治疗,有利于大鼠运动功能的恢复。诱发电位的变化可以反映脊髓传导功能的受损程度,诱发电位技术可以用于SCI定性、定位诊断及预后判断。
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