电点燃癫癎大鼠TNF-α、Caspase3、NF-κB的表达和细胞凋亡变化及其意义的研究

来源 :苏州大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:anlanyuan
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目的:建立大鼠杏仁基底外侧核电点燃癫癎模型,测定大鼠海马TNF-α、Caspase3、NF-κB的表达,以及细胞凋亡情况。探讨TNF-α启动的细胞死亡信号转导机制在癫癎发生发展中的作用。 方法:把双极电极插入大鼠左侧杏仁基底外侧核,给予慢性电刺激使大鼠达到点燃状态,观察其发作过程,并记录脑电图。采用半定量RT-PCR法检测电点燃大鼠海马组织TNF-α、Caspase3mRNA的表达;用免疫组织化学方法测定点燃大鼠海马Caspase3、NF-κB的表达;采用原位末端标记法(TUNEL)检测海马组织细胞凋亡情况。同时设立正常对照组,手术对照组和药物治疗组观察。 结果:(1)29只接受刺激的大鼠,达到点燃的25只,成功率86.2%,平均8.64±4.12次刺激出现5级癎样发作,12.64±4.12次刺激达到点燃,记录后发放时程在21450~119720ms之间。(2)点燃组大鼠海马TNF-α、Caspase3mRNA表达明显升高(p<0.01)。TNF-α和Caspase3mRNA表达呈正相关(p<0.05);(3)免疫组织化学方法结果显示,点燃组海马细胞Caspase3表达明显高于正常组和手术对照组(p<0.05),Caspase3表达与TUNEL阳性细胞数呈正相关,且两者均主要分布于海马CAl、CA3区。(4)点燃组NF-κB活性从胞浆转移至胞核,但抗癫癎药对其表达无显著影响。 结论:杏仁基底外侧核电点燃癫癎模型与人类颞叶癫癎状态高度相似,是研究人类颞叶癫癎机制、药物疗效的理想模型。癫癎海马TNF-α、Caspase3、NF-κB表达上调,共同参与癫癎形成过程。细胞凋亡机制与点燃过程密切相关。TNF-α/TNFRI-Caspase3-细胞凋亡,这一细胞死亡信号转导途径在癫癎的发生发展过程中发挥重要作用。
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