烷化溶血磷脂抗白血病效应的实验研究

来源 :福建医科大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:ZXYCHENLI
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该研究应用ET-18-OCH<,3>(ALP家庭中应用最广的一员)作为研究对象.实验共分五个部分:(1)ET-18-OCH<,3>对HL60细胞的毒性作用及其对HL60细胞Bcl-2原癌基因表达的影响.用台盼蓝拒染法计算活细胞数.光镜、荧光显微镜、电镜下观察凋亡细胞的形态学特征,DNA提取及琼脂糖凝胶电泳观察凋亡细胞DNA降解片段的形成;AO.EB复合染色及流式细胞仪检测细胞凋亡率.RT-PCR法检测Bcl-2 mRNA水平,流式细胞仪检测癌蛋白P26表达;(2)ET-18-OCH<,3>对HL60细胞增殖的抑制作用.以ET-18-OCH<,3>对HL60细胞克隆形成率及生长曲线的影响来反映它的抗增殖效应;(3)ET-18-OCH<,3>对正常造血祖细胞的影响.通过药物处理前后粒-单核系造血细胞(CFU-GM)集落形成活性的改变来分析;(4)ET-18-OCH<,3>对HL60细胞分化的诱导作用.应用瑞氏染色、NBT还原能力测定、细胞化学染色等多个指标从形态学和功能两方面分析分化细胞特性;(5)ET-18-OCH<,3>与其他化疗物的联合作用.用MTT法检测HL60细胞对ET-18-OCH<,3>和/或化疗药物的敏感性.
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