肾虚质大鼠海马SynⅠ蛋白及胆碱含量与肾藏志理论相关性研究

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目的:以“恐伤肾”理论为指导,建立大鼠肾虚质模型,检测肾虚质大鼠空间学习记忆能力、脑海马组织中SynI蛋白表达的差异性,从分子角度探讨大脑海马组织中乙酰胆碱(Ach)、乙酰胆碱酯酶(AchE)含量变化与肾虚质大鼠学习记忆功能的相关性,以及经典补肾方药对大鼠学习记忆功能的干预作用,为临床改善肾虚体质及相关病症的防治提供客观依据。  方法:12周龄清洁级SD大鼠,采用“猫吓鼠”经典造模方法使母鼠肾精受损,子鼠先天肾精不足,接着定时对子鼠进行刺激,造成先天肾精不足+后天恐吓的复合型肾虚质模型。用左归丸、右归丸干预肾虚质子鼠,观察其对子鼠肾虚体质的改善作用,采用Morris水迷宫实验检测大鼠的空间学习记忆能力,酶联免疫吸附试验(ELISA)测定各组大鼠脑海马组织中乙酰胆碱(Ach)、乙酰胆碱酯酶(AchE)含量的变化及蛋白免疫印迹法检测SynI蛋白表达的差异性,进行统计学处理。  结果:①Morris水迷宫行为学变化检测:肾虚质组与空白组相比,空间学习记忆能力普遍下降,定位巡航实验、空间探索实验耗时增加,有统计学意义(P<0.05);与肾虚质组相比,药物组(左归丸组、右归丸组)的潜伏期时长及总路程减少,学习记忆能力相对改善,具有统计学意义(P<0.05);左归丸组与右归丸组在实验观察中虽有差异,但无统计学意义(P>0.05)。②酶联免疫吸附试验(ELISA)检测:肾虚质组与空白组相较,乙酰胆碱(Ach)含量降低,乙酰胆碱酯酶(AchE)含量升高,两组差异性具有统计学意义(P<0.05);药物组与肾虚质组相比,乙酰胆碱(Ach)含量升高,乙酰胆碱酯酶(AchE)含量降低,具有统计学意义(P<0.05);药物组二者之间相比,无统计学意义(P>0.05)。③蛋白免疫印迹(Western Blot)法检测:与空白组比,肾虚质组SynI蛋白表达辉度值降低,有统计学意义(P<0.05);药物组相对于肾虚质组来说,SynI蛋白表达辉度值升高,具有统计学意义(P<0.05);药物组之间虽有差异,但无统计学意义(P>0.05)。  结论:先天不足+后天恐吓的复合型肾虚质动物模型,突出中医体质特色,与肾虚质形成的多因素特点相符;肾虚质大鼠存在空间学习记忆能力障碍,脑海马组织中乙酰胆碱(Ach)、乙酰胆碱酯酶(AchE)含量的变化与其学习记忆能力的降低有相关性;海马组织中SynI蛋白表达差异性可能是判断肾虚质的客观指标;左归丸、右归丸可通过调节乙酰胆碱(Ach)、乙酰胆碱酯酶(AchE)含量和SynI蛋白表达改善肾虚质大鼠的学习记忆能力。
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