【摘 要】
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核糖体是一种无膜结构的细胞器,其主要功能是负责蛋白质的合成。真核生物和原核生物的核糖体均由大亚基和小亚基组成,大亚基和小亚基又是由核糖体蛋白和rRNA组成的。核糖体蛋白种类繁多,在不同物种及同一物种不同组织中组成核糖体的蛋白都存在差异。核糖体蛋白是核糖体的重要组成元件,其突变后会严重影响核糖体的正常功能,部分关键核糖体蛋白的缺失会引起细胞正常生命活动失调,器官发育缺陷甚至致死。植物细胞中同源家族核
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核糖体是一种无膜结构的细胞器,其主要功能是负责蛋白质的合成。真核生物和原核生物的核糖体均由大亚基和小亚基组成,大亚基和小亚基又是由核糖体蛋白和rRNA组成的。核糖体蛋白种类繁多,在不同物种及同一物种不同组织中组成核糖体的蛋白都存在差异。核糖体蛋白是核糖体的重要组成元件,其突变后会严重影响核糖体的正常功能,部分关键核糖体蛋白的缺失会引起细胞正常生命活动失调,器官发育缺陷甚至致死。植物细胞中同源家族核糖体蛋白都是由两个及以上的基因编码,这些同源的核糖体蛋白有的是功能冗余的,有的却在细胞中执行不同的功能。本文研究的拟南芥核糖体蛋白RPL23a由RPL23aA和RPL23aB两个基因编码。通过对RPL23aA和RPL23aB基因及其编码的蛋白质的序列比对发现其基因序列和蛋白序列都高度相似。通过对rpl23aa和rpl23ab单突变体以及RPL23aA/rpl23aa RPL23aB/rpl23ab杂合双突变体的表型观察,发现RPL23aA基因的纯合或杂合突变均会引起植物不同程度的发育缺陷表型,而RPL23aB基因突变后却没有显著的表型,说明在RPL23aA在两个基因中起主导作用。两个基因同时突变后会对植物的正常生长造成严重的影响,说明RPL23a家族对植物的正常生理功能十分重要。用RPL23aA的启动子分别连接RPL23aA基因主体和RPL23aB基因主体回补rpl23aa突变体后,发现rpl23aa突变体的表型均能恢复至野生型,说明rpl23aa的表型确实是由于RPL23aA基因突变所导致的,并且RPL23aA和RPL23aB在功能上是冗余的。通过GUS染色发现RPL23aA和RPL23aB基因在植物的各个组织中均有表达,且这两个基因的表达丰度变化趋势基本相同,但RPL23aB的表达程度要稍弱于RPL23aA,这说明了RPL23aA和RPL23aB之间可能存在剂量效应。用35S启动子分别连接了RPL23aA和RPL23aB基因主体并转入野生型中后,发现在T1代中部分拟南芥出现了一种花序成簇、果荚弯曲的表型,通过Western Blot和qRT-PCR方法检测发现在有表型的个体中,RPL23aA和RPL23aB的转录和翻译水平反而下降,推测表型的产生可能是由于共抑制引起的。
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