番茄褪绿病毒（Tomato chlorosis virus,ToCV）,是毛形病毒属（Crinivirus）的一员,由昆虫介体粉虱进行传播。近年来,ToCV在我国番茄产区,呈现爆发性扩展态势,给我国番茄安全生产造成严重威胁。生产上目前尚无ToCV抗性品种,研究ToCV的致病性及其分子机制,可为抗性育种提供理论依据。ToCV编码的P7蛋白是一个功能未知的小分子蛋白,并包含有一个跨膜结构域。本研究以P7蛋白为对象,探究其在ToCV侵染过程中所发挥的功能。本论文主要研究内容包括:采用特异性RT-PCR克隆ToCV P7基因,并将其构建至马铃薯X病毒载体（Potato virus X,PVX）,获得P7基因异源病毒表达载体PVX:P7。利用农杆菌介导技术,在本氏烟植株中异源表达ToCV P7蛋白。PVX:P7接种本氏烟12 dpi,出现了严重的斑驳花叶以及皱缩现象。Western blotting以及RT-qPCR实验结果表明,与对照（PVX:GFP）相比,PVX:P7可以显著增加PVX CP在植物体内蛋白质和mRNA的积累。表明P7可以促进PVX侵染本氏烟,具有致病功能。P7蛋白超表达转基因番茄植株,转基因番茄矮小,叶片皱缩,结实率低。表明P7蛋白确实具有致病功能。将P7蛋白进行平均分段,分为N1-33端和C34-65端,其中跨膜结构域位于N1-33端;分别构建重组PVX病毒载体,通过农杆菌接种本氏烟。寄主表型及PVX定量结果表明,P7蛋白的C34-65端是P7蛋白行使致病功能的关键区域。利用酵母双杂交、双分子荧光互补（BiFC）和荧光素酶互补成像（LCI）等技术,研究发现P7蛋白可以发生自身相互作用。BiFC结果表明P7蛋白自身互作的亚细胞定位位于细胞质膜,这与P7蛋白的单独亚细胞定位相同。将P7蛋白分段,酵母双杂交结果表明P7蛋白发生自身相互作用的关键区域为P7蛋白的N1-33端。为了探究P7蛋白致病性的分子机理,利用GFP-trap和LC-MS/MS技术,筛选与P7蛋白可能互作的寄主因子。筛选到两个在植物甲基循环中所必需的酶:腺苷激酶（Adenosine kinase,ADK）和S-腺苷甲硫氨酸合成酶（S-adenosylmethionine synthase,SAMS）,推测P7蛋白可能影响植物甲基化,从而发挥其致病功能。将重组PVX病毒载体PVX:P7注射入16c-TGS烟草（35S启动子区域DNA被甲基化沉默,GFP基因不表达）,发现P7蛋白可以抑制寄主转录水平的基因沉默（TGS）,降低16c-TGS转基因烟草中35S启动子区域的DNA甲基化水平,恢复16c-TGS烟草中GFP的表达。