【摘 要】
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目的:小口径血管移植物(SDVGs)(直径≤5mm)在临床心血管疾病中的需求越来越广泛,特别是冠状动脉和周围血管疾病等。虽然全动脉化搭桥手术具有良好的远期通畅率,但自体血管常因为病人的条件而限制。纯合成材料制成的人工小血管有诸多潜在的缺陷,如血栓形成、血管内膜增生、钙化、慢性炎症和无生长潜力等。虽然脱细胞小动脉保留了血管的弹力纤维结构,可以用作组织工程血管支架,但是脱细胞处理过程中可能会使血管的生
【基金项目】
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国家自然科学基金项目(No.81571826,No.31330029);
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目的:小口径血管移植物(SDVGs)(直径≤5mm)在临床心血管疾病中的需求越来越广泛,特别是冠状动脉和周围血管疾病等。虽然全动脉化搭桥手术具有良好的远期通畅率,但自体血管常因为病人的条件而限制。纯合成材料制成的人工小血管有诸多潜在的缺陷,如血栓形成、血管内膜增生、钙化、慢性炎症和无生长潜力等。虽然脱细胞小动脉保留了血管的弹力纤维结构,可以用作组织工程血管支架,但是脱细胞处理过程中可能会使血管的生物力学性能下降,加速血管的弹性变形和退化,最后导致血管移植物扩张,甚至动脉瘤形成。为了解决这些问题,本研究中我们在天然脱细胞小动脉血管支架外覆以纳米高分子材料血管外膜、血管支架内膜肝素化涂层,制备复合型组织工程血管(HTEV),提高组织工程血管的抗张强度,并改善其组织相容性。材料和方法:第一部分实验中,我们使用联合去污剂、DNA酶和RNA酶处理大鼠主动脉,制备生物血管支架。并通过检测脱细胞后血管DNA含量明确脱细胞效果,利用组织学检测和扫描型电子显微镜对脱细胞后胶原纤维的损伤进行评价。第二部分实验中,采用纳米聚己内酯(PCL)静电纺丝(ES)外覆技术提高大鼠脱细胞血管支架的机械性能,制备复合型小口径组织工程血管支架。检测各组血管支架的壁厚、缝合强度、爆破压力、径向和轴向拉伸等,以明确纳米PCL包覆后生物力学方面的优越性。第三部分实验中,使用肝素修饰复合组织工程人工血管支架内膜,采用荧光染色法明确肝素在人工血管内膜的结合,并体外验证其生物相容性。第四部分实验中,行复合组织工程血管体内植入和生物学功能评价,建立同种异体的大鼠肾下腹主动脉移植模型,术后6周应用超声和小动物CT检测移植血管的血流速度、血管形态和结构的变化,术后12周应用组织学及免疫荧光染色观察移植物细胞重构及血管炎症等,明确体内移植后复合组织工程血管的优越性。结果:大鼠主动脉经脱细胞处理后,细胞成分能被完整去除,但对于胶原纤维以及弹力纤维造成一定程度的损伤。去细胞过程显著降低了脱细胞血管支架的径向和轴向拉伸应力,而PCL-ES包覆改造后明显增强了HTEV支架的轴向应变和抗爆裂压力,而且高于天然血管,显示出良好的生物力学顺应性。肝素修饰后的脱细胞血管内膜具有较强的抗血小板粘附作用,与天然血管抗血小板粘附能力相当,显示HTEV具有良好的生物相容性。大鼠肾下腹主动脉异体血管移植后发现,HTEV内膜内皮化及血管通畅性良好,纳米PCL静电纺丝包覆能防止去细胞主动脉扩张和动脉瘤形成,且能够诱导平滑肌细胞生长并阻止血管外炎症细胞浸润,进而减轻管腔内膜增生。结论:通过在天然脱细胞小动脉血管支架外覆以纳米PCL静电纺丝血管外膜、血管支架内膜肝素化涂层,成功制备了复合型组织工程血管(HTEV),大大提高了组织工程血管的抗张强度,并改善了组织相容性,为组织工程人工小血管的制备提供新的理论基础。新型复合型组织工程血管具有良好的临床应用前景。
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