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目的阐述本地区儿童重症监护病房金黄色葡萄球菌感染的临床特征,探讨儿童耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)感染的危险因素;分析临床所分离的MRSA菌株对抗菌药物的耐药情况及其毒力基因携带情况,检测MRSA菌株的分子分型以明确各菌株之间的相关性,为本地区儿童重症监护病房MRSA的防治提供科学依据。方法(1)回顾性分析我院儿童重症监护病房近3年来感染金黄色葡萄球菌患儿的病历信息及相关临床资料,对年龄、性别的等17种临床相关因素进行单因素分析及非条件Logistic回归多因素分析其危险因素;(2)VITEK-2对临床分离的金黄色葡萄球菌进行细菌鉴定;(3)纸片扩散法药敏试验检测金黄色葡萄球菌对儿科常用抗菌药物的耐药性;(4)微量肉汤稀释法检测MRSA的最低抑菌浓度(MIC);(5)万古霉素受损试验检测是否存在异质性万古霉素中介的金黄色葡萄球菌(hVISA)及万古霉素中介的金黄色葡萄球菌(VISA);(6)聚合酶链反应技术(PCR)检测MRSA菌株的耐药基因mecA、肠毒素基因sea和seb、杀白细胞素基因PVL、溶血素基因hla和hl6、肠毒素调控基因agrl-4、中毒性休克综合症毒素基因tst、表皮剥脱毒素基因eta和etb在MRSA菌株的携带率;(7)葡萄球菌A蛋白基因多态性分析(spa)、脉冲场凝胶电泳(PFGE)及多位点序列分型(MLST)等细菌分子分型方法对MRSA进行分子分型研究。结果(1)102例金黄色葡萄球菌感染患儿纳入研究,年龄上以婴儿(出生-1周岁)为主(64.7%),基础疾病以感染性肺炎为主(63例),死亡率为9.8%(10/102);(2)单因素分析显示胃管、吸痰、气管插管/切开、呼吸机、导尿、抗生素使用种类(≥3种)、抗生素使用时间(≥2周)、免疫抑制剂/激素、丙种球蛋白和住院时间(≥30天)与MRSA感染的发生密切相关;非条件Logistic回归多因素分析显示进行机械气管插管/切开治疗、呼吸机治疗和抗生素使用≥3种是儿童感染MRSA的独立危险因素;(3)临床共分离金黄色葡萄球菌102株,来源以痰液为主占59.8%,其次是鼻拭子及咽拭子,分别占21.6%,9.8%;(4)MRSA的检出率为37.3%,,MRSA对临床常用抗生素的耐药率分别为红霉素(92.1%)、克林霉素(94.7%)、链霉素(52.6%)、庆大霉素(26.3%)、四环素(18.4%)、氯霉素(71.1%)、环丙沙星(55.3%)、莫西沙星(28.9%)、左氧氟沙星(39.5%)、磺胺甲噁唑(5.3%);对利福平、利奈唑胺、呋喃妥因和万古霉素敏感率较高,未发现VISA和hVISA。MRSA对大环内酯类、林可霉素类、氨基糖苷类、四环素类等耐药率均比甲氧西林敏感金黄色葡萄球菌(MSSA)高,且两者差异均有统计学意义(P<0.05);(5)毒力基因检测显示sea、seb携带率均为47.4%,hla携带率为97.4%,hlb携带率为76.3%,agrl携带率为42.1%,agr2携带率为2.6%,agr3携带率为10.5%,PVL检出率为21.2%,agr4、eta、etb、tst均未检出。携带2种、3种、4种和5种毒力基因的菌株分别占 21.1%(8/38)、26.3%(10/38)、34.2%(13/38)、15.8%(6/38);(6)spa多态性分析结果示,38株MRSA共发现7个spa型,以t172型为主(15株,39.5%),其次为t437(10株,26.3%);(7)PFGE结果显示35株MRSA(3株分离株失败)分为2个聚类组:簇3(25/35)(相似素>80%)和簇4(6/35)(相似素>85%),并发现了4个偶发株。(8)MLST分型结果显示38株MRSA可分为6个ST型,发现优势型为ST59型(n=31,81.6%),其余5个ST型分别为 ST1(n=1,2.6%),ST88(n=1,2.6%),ST398(n=3,7.9%),ST965(n=1,2.6%),未发现新的ST型菌株。结论(1)近3年内本地区儿童重症监护病房感染的金黄色葡萄球菌中MRSA的检出率为37.3%。(2)MRSA的产生由多因素所致,机械气管插管/切开治疗、呼吸机治疗和多种抗生素使用是本地区儿童重症监护病房患儿感染MRSA的独立危险因素。(3)临床分离金黄色葡萄球菌耐药问题严重,MRSA对大环内酯类、四环素类、林可霉素类耐药率明显高于MSSA。(4)毒力基因检测发现本地区MRSA毒力基因复杂,多数菌株可能包含多个毒力基因,表明耐药程度严重,多重耐药模式复杂。(5)分子流行病学研究显示ST59-t172型(39.5%)及ST59-t437(26.3%)为本地区流行菌株,ST-59型MRSA的大量检出(81.6%),需警惕其流行爆发趋势。科学合理的使用抗生素,规范侵入性治疗的操作,多途径控制危险因素,加强耐药基因的监控,有利于控制MRSA感染流行,降低耐药率的发生。