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近年来通过对大豆抗营养物质的不断深入研究,发现日粮中抗营养物质β-conglycinin会引发多种幼龄动物产生过敏反应,而且不同种属动物的过敏程度也不同。有研究表明β-conglycininβ亚基线性表位与兔、仔猪、狗、鲈鱼过敏血清结合能力有显著差异,但对于β-conglycininα亚基线性表位与不同种属动物过敏血清结合能力差异比较的研究较少。本论文利用生物信息学方法,综合已发表文献选取四段比较具代表性氨基酸序列,合成四段表位肽,通过ELISA和点杂交的方法研究比较不同种属动物过敏血清与表位肽结合程度,进而研究大豆抗原蛋白β-conglycinin线性表位与其不同种属物产生抗原表位差异比较。试验Ⅰ:生物信息学预测β-conglycinin抗原表位的研究本试验运用DNAstar,the BepiPred 1.0两种生物信息学软件,根据蛋白质的一些理化性质如抗原指数、柔韧性、亲水性、表面可及性等预测β-conglycininα和β亚基的线性表位,并综合已发表文献筛选出四段比较具有代表性的氨基酸序列。试验Ⅱ:β-conglycinin与不同种属动物过敏血清结合能力差异比较本试验依据抗原与抗体特异性反应的原理,将合成的短肽作为抗原,兔、仔猪、犊牛的致敏血清作为抗体,通过Elisa和点杂交方法比较四段表位肽与兔、仔猪、犊牛过敏血清结合能力差异,从而对比β-conglycinin线性表位与不同种属动物过敏血清结合能力差异的研究,结果表明:同一种动物与四段不相同合成肽段结合敏感程度有显著差异(P<0.05),兔过敏血清与肽段β1结合能力最强,仔猪过敏血清与α1肽段结合能力最强,犊牛过敏血清与肽段β2肽段结合能力最强;不同种属动物与同一肽段结合敏感程度有显著差异(P<0.05),肽段α1与犊牛血清结合能力最强,肽段α2与仔猪、犊牛过敏血清结合能力相对较强,肽段β1与三种动物过敏血清反应无明显差异,肽段β2与犊牛血清结合能力最强。综上所述:生物信息学相关软件可以比较快速准确地预测出抗原表位所在区域,ELISA和点杂交方法证明β-conglycinin的四段表位肽与三种不同种属动物过敏血清的结合能力有显著差别,本研究为揭示不同种属动物对大豆抗原蛋白致敏差异的相关机制奠定理论基础,也为优化抗原蛋白检测方法提供技术支持。