第一部分右美托咪定减轻顺铂诱导的化疗相关的认知功能损伤背景:化疗诱导的认知障碍(CICI)通常在化学治疗剂给药期间或之后发生,并引起多种神经学问题。目前尚无有效的CICI治疗方法。右美托咪定(Dex)作为一种公认的镇静剂,具有抗氧化、抗炎和抗凋亡作用。Dex介导mi RNA对顺铂诱导的认知障碍机制有待进一步探讨。目的:探索Dex在顺铂诱导的认知功能障碍中的作用。方法:向南昌大学动物实验中心购买18只200-250 g雄性SD大鼠,饲养一周后开始造模。将成年雄性大鼠随机分为3组,每组6只。对照组大鼠每周腹腔注射5mg/kg生理盐水;模型组大鼠每周腹腔注射5 mg/kg顺铂;治疗组在大鼠每周腹腔注射5 mg/kg顺铂前30 min腹腔注射30μg/kg Dex。每周一次,连续4周。运用水迷宫实验检测大鼠学习记忆能力;通过尼氏染色实验判断海马神经元存活情况;通过透射电镜实验检测海马神经元超微结构和病理学改变。结果:1.水迷宫实验:Dex治疗组大鼠游泳路径显著长于健康对照组,Dex治疗顺铂诱导的大鼠后,游泳路径显著缩短。与健康对照组相比,顺铂模型组游泳速度第一天、第二天没有显著差异,第三天、第四天游泳速度明显下降(P<0.05);与顺铂模型组相比,Dex治疗组游泳速度第一天、第二天没有显著差异,第三天、第四天游泳速度显著提高(P<0.05);健康对照组与Dex治疗组游泳速度没有显著差异(P>0.05)。与健康对照组相比,顺铂模型组潜伏期第一天、第二天没有显著差异,第三天、第四天潜伏期明显延长(P<0.05);与顺铂模型组相比,Dex治疗组潜伏期第一天、第二天没有显著差异,第三天、第四天潜伏期显著缩短(P<0.05);健康对照组与Dex治疗组潜伏期没有显著差异(P>0.05)。2.尼氏染色实验:与健康对照组相比,顺铂模型组大鼠海马神经元细胞数明显减少,经Dex治疗后,细胞数明显增加。3.透射电镜实验:相对于健康对照组,顺铂模型组神经元细胞的线粒体肿胀、嵴结构连续性遭到破坏且模糊;经Dex治疗后,神经元的细胞器部分损伤,线粒体嵴部分损伤。结论:右美托咪定可以保护神经元细胞免受顺铂诱导的认知功能损伤。第二部分mi RNA测序筛选Dex对顺铂诱导的CICI相关的mi RNA目的:通过mi RNA测序筛选以及验证Dex治疗组、顺铂模型组与健康对照组大鼠海马组织差异表达的mi RNA。方法:Dex治疗组、顺铂模型组与健康对照组大鼠海马组织通过总RNA提取,RNA质检,文库构建,测序质量评估,mi RNA基因表达量和差异表达谱分析,mi RNA测序来筛选差异表达的mi RNA以及对预测的mi RNA靶基因进行GO功能分析和KEGG代谢通路分析。通过qRT-PCR验证5个候选mi RNA。结果:我们发现在模型组和治疗组间存在差异表达的mi RNAs共筛选出39个,其中在大鼠海马组织中有24个mi RNAs上调,15个mi RNAs下调。GO和KEGG富集分析表明差异表达(DE)的mi RNA靶基因主要参与DNA-模板化、转录调控等生物过程,参与轴突导向、Wnt、MAPK、Hippo等信号通路。此外,PCR证明相对于顺铂模型组,mmu-mi R-429-3p在Dex治疗后显著上调。结论:候选mmu-mi R-429-3p在Dex治疗组中显著上调。第三部分右美托咪定通过mmu-mi R-429-3p减轻顺铂诱导的线粒体功能障碍目的:探索Dex介导mmu-mi R-429-3p在顺铂诱导的海马神经元损伤方面的作用机制。方法:通过转染或不转染mmu-mi R-429-3p的模拟物和抑制物,运用q RT-PCR与免疫荧光分别检测Dex与mmu-mi R-429-3p对顺铂诱导的mt DNA损伤与海马神经元凋亡的影响。结果:q RT-PCR与免疫荧光实验结果显示右美托咪定减轻顺铂诱导的mt DNA损伤与海马神经元凋亡,而且介导mmu-mi R-429-3p减轻顺铂诱导的mt DNA损伤与海马神经元凋亡。结论:Dex介导mmu-mi R-429-3p减轻顺铂诱导的大鼠认知功能损伤。