同位素标记与免疫印迹法鉴定小鼠神经元磷蛋白

来源 :泸州医学院 西南医科大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:hhkjtest
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本文创建了一套高灵敏度、高特异性的分析鉴定磷蛋白的优化方案,并应用此方案鉴定小鼠神经元可逆蛋白磷酸化修饰信号转导系统中关键磷蛋白:磷脂酰肌醇3激酶γ调节亚基(PI3Kr3)、促分裂原活化蛋白激酶激酶-1(MEK1)、蛋白激酶C-α亚型(PKCα),为信号转导功能蛋白质组学的研究奠定基础。经实验得出如下结论: ①同位素标记与免疫印迹结合可以获得准确、完整的小鼠神经元磷蛋白组图谱。 ②经特异性化学发光免疫印迹检测,放射自显影图谱上初步鉴定的三种小鼠神经元磷蛋白确证为PI3Kr3、MEK1、PKCα。 ③本研究建立的以同位素标记和免疫印迹为核心的分析鉴定磷蛋白的一整套优化方案,灵敏度高、特异性强,在信号转导蛋白质组学研究中具有较高的优越性。
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