论文部分内容阅读
目的：白血病是我国儿童和青少年最常见的恶性疾病,揭示儿童急性白血病的发病机制,对于防治儿童白血病具有非常重要的意义。同其它恶性肿瘤一样,儿童急性白血病的发生也是多因素参与,确定儿童急性白血病常见的致病基因,将其定位、分离,并研究其生物学功能成为儿童白血病研究中极其重要的方面。WAVE1 (WASP-family verprolin homologous protein 1)为近年来发现的新型肌动蛋白调节蛋白,在肌动蛋白聚合和细胞骨架重排中发挥重要作用。近年研究发现WAVE1在人类血液系统肿瘤细胞株中高表达。前期课题已经发现WAVE1在儿童急性白血病患儿BMMCs中高表达,并发现WAVE1与耐药及抗凋亡作用密切相关,但其与白血病作用机制尚未完全明确。本实验检测WAVE1和PDGFR-β在儿童急性白血病患者及HL-60、Raji细胞中的表达,探讨WAVE1和PDGFR-β与白血病的关系,并研究二者之间是否存在调控关系。方法：收集急性白血病患者骨髓标本,根据病程分为初治组、复发组、缓解组,同时收集同期贫血查因患者骨髓标本为对照组,提取骨髓单个核细胞,RT-PCR方法检测WAVE1和PDGFR-β在mRNA水平的表达；培养HL-60、Raji细胞,分为转染pcDNA3.1-WAVE1组(转染组)和转染pcDNA3.1空载体组(对照组),转染WAVE1 siRNA组(干扰组)和转染空干扰载体组(对照组),转染48小时后收取细胞提取RNA和蛋白,分别以RT-PCR、Western Blot方法在mRNA、蛋白水平检测WAVE1和PDGFR-β表达。结果：1.在急淋和急非淋中,与缓解组和对照组比较,初治组和复发组的WAVE1和PDGFR-β表达均显著增高(P<0.05)；初治组和复发组比较及缓解组和对照组比较,WAVE1和PDGFR-β的表达无差异(P>0.05)。2.在mRNA水平,HL-60细胞、Raji细胞干扰组WAVE1表达明显降低,而PDGFRβ表达分别为对照组的182%及141%；转染组WAVE1相对于对照组增加40%、55%,而PDGFRβ表达分别为对照组的54%、65%。3.在蛋白水平,HL-60细胞、Raji细胞内干扰组WAVE1表达明显降低,而PDGFRβ表达分别为对照组的157%及146%；转染组WAVE1相对于对照组增加45%、54%,而PDGFRβ表达分别为对照组的59%、60%。结论：1.WAVE1和PDGFR-β在急性白血病的初治组、复发组高表达,缓解组低表达,并与病程相关。2. HL-60、Raji细胞在mRNA水平、蛋白水平均有WAVE1、PDGFR-β的表达,WAVE1表达增高而PDGFR-β表达下调,WAVE1表达降低而PDGFR-β表达上调。