厚朴酚(Magnolol)与和厚朴酚(Honokiol)是中药厚朴中的两个主要活性成分,具有良好的抗炎、抗菌、抗肿瘤、降胆固醇和抗衰老等广泛的药理活性,且毒副作用小。厚朴酚与和厚朴酚溶解性差,在潮湿、阳光、高温等条件下极易发生氧化、聚合、缩合等反应,限制了其应用。采用纳米技术,将厚朴酚、和厚朴酚与载体制备成载药纳米微球则可克服上述不足,目前该研究鲜有报道。本论文以壳聚糖为载体制备厚朴酚、和厚朴酚-壳聚糖载药纳米微球,确定最佳制备条件,对载药纳米微球的体外药物释放行为、抗氧化活性和对癌细胞的细胞毒性进行了研究。为增强所制备的载药纳米微球对癌细胞的靶向作用,将叶酸偶联到载体壳聚糖分子上制备厚朴酚-叶酸偶联壳聚糖载药纳米微球。此外,为了验证本制备方法的普适性,将药物模型换成与厚朴酚、和厚朴酚分子结构类似的白藜芦醇,制备载药纳米微球。本论文主要研究工作如下:1.厚朴酚或和厚朴酚-壳聚糖载药纳米微球制备及生物活性:采用离子交联法通过调节体系pH值、交联剂三聚磷酸钠浓度、稳定剂泊洛沙姆188浓度和乙醇的含量,确定最佳条件制备厚朴酚、和厚朴酚-壳聚糖载药纳米微球。原子力显微镜(AFM)观察纳米微球形貌和尺寸;通过紫外光谱(UV)和红外光谱(FT-IR)对纳米微球进行表征;用X射线粉末衍射(XRD)和动态光散射法(DLS)确定药物在纳米微球中的状态和微球在溶液中的分散性、稳定性;差式扫描量热法(DSC)和热重分析(TG)确定纳米微球的组成和药物的热稳定性;高效液相色谱(HPLC)测定纳米微球的载药量、包封率;紫外法测定体外药物释放曲线;二苯代苦味酰基自由基法(DPPH?)法测定纳米微球的清除自由基能力;MTT法测纳米微球对不同细胞的细胞毒性。结果表明,厚朴酚、和厚朴酚-壳聚糖载药纳米微球成球稳定、粒径均一,大小在100 nm左右,溶液中分散性较好。所制备的厚朴酚-壳聚糖载药纳米微球载药量为81.71?g/mg,包封率为20.27%;和厚朴酚-壳聚糖载药纳米微球的载药量为240.64?g/mg,包封率为59.68%。载药纳米微球有一定的缓释和控释能力,能保持药物的抗氧化活性,对多种癌细胞都有较好的抗癌活性。将异硫氰酸荧光素标记到壳聚糖分子上,以厚朴酚为药物模型制备荧光标记的厚朴酚-壳聚糖载药纳米微球研究其细胞摄取情况。结果表明,L02细胞和SMMC7721细胞都能很好的摄取载药纳米微球,且癌细胞能摄取更多的纳米微球。2.厚朴酚-叶酸偶联壳聚糖载药纳米微球的制备及其细胞毒性:将叶酸分子通过酰化反应偶联到壳聚糖分子上,以叶酸偶联壳聚糖为载体,以厚朴酚为药物模型,在最佳反应条件下制备纳米微球。对制备的厚朴酚-叶酸偶联壳聚糖载药纳米微球的形貌、尺寸、在溶液中的分散性、稳定性进行表征,测其载药量、包封率,并对厚朴酚的体外释放行为进行测试。结果表明,所制备的纳米微球成球稳定,粒径均一,大小在180 nm左右,溶液中分散较好,载药量为155.09?g/mg,包封率为38.46%。在酸性环境中释放速率低于中性环境,有一定的pH选择性,对SMMC7721细胞的细胞毒性大于L02细胞,有一定的靶向性。3.白藜芦醇-壳聚糖载药纳米微球的制备:以白藜芦醇为药物模型,以壳聚糖为载体,在最佳反应条件下制备纳米微球。对制备的白藜芦醇-壳聚糖载药纳米微球的形貌、尺寸、在溶液中的分散性、稳定性进行表征,并测其载药量、包封率。结果表明,所制备的纳米微球成球性好,粒径均一,大小在150 nm左右,溶液中分散性好,载药量达到48.81?g/mg时,包封率为11.71%。验证了本论文制备方法的普适性。