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银杏叶多糖是一种具有较强的免疫调节作用、抗肿瘤和降血压的功能性多糖。但是植物多糖的制备常常受到季节、地域等自然条件的限制,并可能造成自然资源的枯竭。由于植物内生菌能产生和其共生植物相同或相似生物活性物质,因此可以从健康银杏组织中筛选菌株,通过发酵得到生物活性相似的类银杏多糖。此研究对于类银杏多糖的进一步研究应用具有重要意义。对源于健康银杏植株的细菌内生菌Endo Gin Ya6进行生理生化鉴定及系统发育分析,进而进行产胞外多糖发酵条件的优化。通过美拉德反应将菌株胞外多糖与大豆肽结合形成糖-肽复合物,并对菌株胞外多糖及糖-肽化合物抗氧化能力进行了研究。主要研究内容如下:1.银杏内生菌Endo Gin Ya6经生理生化实验鉴定为芽孢杆菌属(Bacillus)细菌。16S rDNA序列同源性分析为Endo Gin Ya6与芽孢杆菌(Bacillus)和球形赖氨酸芽孢杆菌(Lysinibacillus sphaericus)同源性达到99%,系统发育分析表明Endo Gin Ya6占据着独立的一个分支。2.利用单因素及正交试验对银杏内生菌Endo Gin Ya6发酵产胞外多糖条件进行优化,最终确定菌株产胞外多糖最佳培养基组成为蔗糖12%,酵母浸粉0.8%,氯化钠0.5%,磷酸氢二钾0.1%,氯化钾0.1%,培养基初始pH 7.5;最佳发酵条件为:装液量70mL,28℃,摇床转速200r/min,接种量2%,培养时间30h,在此条件下进行验证试验,菌株产胞外多糖能力可达10.27g/L。3.利用Sevag法脱蛋白,进而透析,初步分离纯化银杏内生菌Endo Gin Ya6胞外多糖,并利用美拉德反应将胞外多糖与大豆肽复合,得到糖-肽复合物产品。4.对菌株胞外多糖及其产品糖-肽复合物进行抗氧化研究。结果表明,菌株胞外多糖及糖-肽复合物对超氧阴离子的清除能力,分别可达29.23%和31.92%;同时,胞外多糖及糖-肽复合物还有一定的还原能力、羟基自由基清除能力、清除DPPH自由基能力以及金属铁离子螯合能力,且糖-肽复合物各项指标均高于胞外多糖。