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脱水穿心莲内酯琥珀酸半酯(Dehydroandrographolidesuccinate,DAS)的化学名为14-脱羟-11,12-二脱氢穿心莲内酯-3,19-二琥珀酸半酯,是由以中药穿心莲叶中提取的有效成分穿心莲内脂为中间体,在吡啶催化下与琥珀酸酐反应所得到的。DAS具有明显的抗炎作用,能抑制炎症时毛细血管通透性的增高和炎性水肿的发展,并能减少炎性渗出量,但对增生性炎症则无明显影响。临床用于呼吸道及肠道感染性疾病有较好疗效。
非诺贝特(Fenofibrate,系非诺贝特酸的前体化合物)化学名为2-甲基-2-(4-(4-氯苯甲酰基)苯氧基)丙酸异丙酯,属于氯贝丁酸衍生物类血脂调节药,通过抑制极低密度脂蛋白和甘油三酯的生成并同时使其分解代谢增多,降低血低密度脂蛋白、胆固醇和甘油三酯。其适用于高胆固醇血症、高甘油三酯血症及混合型高脂血症,也可用于高脂血症伴有糖尿病、高血压或其他心血管病。
本研究对DAS在大鼠体内的药代动力学过程,以及对在大鼠血浆中非诺贝特酸含量的测定方法进行研究。
1.脱水穿心莲内酯琥珀酸半酯的药代动力学研究
本文建立了采用高效液相色谱-串联质谱法(HPLC/MS/MS)测定大鼠血浆中DAS的浓度。本实验采用PinnacleⅡC18(150×2.1mm,5↘m)色谱柱,并以甲醇-水(70:30,v/v)为流动相,流速0.25mL/min,柱温24℃进样,进样量为20↘L。内标(IS)选用格列吡嗪。血浆样品预处理方法采用乙醚-二氯甲烷(3:2,v/v)液液萃取。离子源采用电喷雾离子化(TurboIonspray)源,负离子方式检测,扫描方式为多反应监测(MRM)模式。分析方法中DAS的的定量下限均为5ng/mL,在5~2500ng/mL范围内线性关系良好。经方法学确证,建立的分析方法适合于大鼠血浆样品中DAS的浓度的测定,并采用该方法分别测定大鼠单次口服,腹腔及尾静脉给药穿琥宁(DAS的单钾盐)后血浆中DAS的药物浓度,得出待测物在大鼠体内的药动学参数。
2.非诺贝特酸的方法学研究
本文建立了HPLC/MS/MS法测定大鼠血浆中非诺贝特酸的浓度。实验采用了DiscoveryC18(50×2.1mm,5↘m)色谱柱。以甲醇-水-甲酸(75:25:0.25,v/v/v)为流动相,柱温25℃,进样量20↘L,流速为0.25mL/min.进样。内标选用双氯芬酸。血浆样品预处理方法采用正己烷:二氯甲烷:异丙醇(100:50:5,v/v/v)液液萃取。离子源采用电喷雾离子化(TurboIonspray)源,负离子方式检测,扫描方式为多反应监测(MRM)模式。分析方法中非诺贝特酸的定量下限为5ng/mL,在5~1250ng/mL范围内线性关系良好。经方法学确证,建立的分析方法适用于大鼠血浆样品中非诺贝特酸的浓度测定,并采用该方法检测了大鼠单次口服非诺贝特后,血浆中非诺贝特酸的药物浓度,得出此种化合物在大鼠体内的药动学参数。