背景 抑郁症病因未明，具有较高的发病率和复发率，并给社会带来了沉重的疾病负担。现有的抗抑郁药物起效较慢、疗效有限；而且，有的药物对神经递质的作用机制相反却同样能产生抗抑郁效果，这些临床矛盾现象很难用单胺理论来解释。近年来，国内外研究人员利用各种抑郁模型作了大量有关神经生物和精神药理方面的研究。鉴于应激与抑郁发病的密切关系，应激模型在抑郁发病机理的研究和抗抑郁药的筛选中应用最为普遍。越来越多的证据表明抑郁的发生以及抗抑郁药物的作用机制相当复杂，涉及到脑内多种物质和通路的异常，但仍未找到最后通路。 谷氨酸是脑内重要的兴奋性神经递质，大量研究显示，该通路中的N-甲基-D-天冬氨酸(N-Methyl-D-Aspartate，NMDA)受体参与了兴奋性突触传递、神经可塑性、神经发育与老化、学习和记忆等重要生理过程。目前，谷氨酸的兴奋性毒性作用也被认为与一些神经精神疾病如脑血管疾病、创伤、癫痫、精神分裂症的病理机制相关。有关NMDA受体与焦虑抑郁障碍的研究较少，但体外实验已提示某些抗抑郁药物能够直接阻断NMDA受体通路与一氧化氮合酶(Nitric oxide synthesis，NOS)的表达和活性；而一些NMDA受体拮抗剂或NOS抑制 浙江大李硕士学位论文剂可能具有类似的抗抑郁作用。有关慢性应激抑郁模型脑内NMDA受体主亚基蛋白NRI的表达情况国内外尚未见报道。 目的 本研究拟采用慢性轻度应激和分养两种经典模型结合的方式，利用长期不可预见性的轻度应激来建立大鼠抑郁模型，结合大鼠体质量及行为学变化，分别采用分光光度法和免疫印迹技术检测抑郁大鼠前额叶、海马区一氧化氮(Nitricox记e，NO)含量和NMDA受体主亚基蛋白(NRI)表达的变化，旨在揭示慢性应激对谷氨酸一NMDA受体一NO通路的影响，探讨抑郁发生的可能机制，为抗抑郁药物的研制与开发提供线索。 方法 将16只成年雄性SPrague一Dawley大鼠随机分为对照组和慢性应激模型组，采用变换饲养环境、昼夜节律以及调整饮食和供水等多种慢性轻度不可预见性应激建立大鼠抑郁模型，以体质量及行为学改变来确保模型的可靠性。在建立模型的基础上采用分光光度法检测大鼠前额叶和海马区 NO含量的变化;免疫印迹法分析相应脑区NRI的表达情况。 结果 1.模型组大鼠体重增长缓慢，活动能力下降，兴趣丧失，成功模拟了临床抑郁症的精神抑制症状。到建模结束时，对照组和模型组的体重增加量分别为 (128.19士18.22)g和(80.75士13.38)g，两组间差异具有显著统计学意义 (P=0.OOO);在敞箱实验中，模型组大鼠活动量(22.62士12.26)明显少于对照组(43.75士19.88)，差异具有统计学意义(P=0.023):模型组大鼠应激前后的绝对蔗糖消耗量分别为(82.31士10.08)g和(70.81士13.59)g，后者少于前者，但差异未达到统计学意义护匕0.060)，而相应的相对蔗糖消耗量(绝对量/体重)分别为(0.28士0.03)和(0.19士0.04)，差异具有显著统计学意义(P=0.001)。 2.长期轻度应激后，大鼠前额叶和海马区NO的含量均明显增加，对照组与模型组大鼠前额叶区No含量分别为(26.97士1 .38)runoUmg·pro和(31.00士2.55)爹 浙江大学硕士学位论文nmoUmg·pro(P=0.0o2)，相应海马区的NO含量分别为(36.06士0.87)nmo枷g·pro和(38.11士1.73)nlno饰g.pro(P=0.010)。相关分析显示，抑郁模型大鼠海马区NO含量与大鼠的自发活动量呈负相关(:二一0.755，尸二0.031)。 3.免疫印迹分析提示，慢性应激会增加大鼠海马区NRI的表达(P=0.004)，而前额叶区的NRI表达却未见有明显变化(作0.659)。抑郁大鼠海马区NRI的表达量与活动量具有相关性(r=一0.719，尸=0.045)。 结论 1.研究将慢性轻度应激和分养两种经典模型结合，利用长期不可预见性的轻度应激，成功建立了较为理想的抑郁动物模型，这为深入研究抑郁发病机理提供了实验平台。 2.慢性应激可促进前额叶、海马区NO的合成;同时可增加海马区NRI的表达;海马区的这些变化与大鼠的自发活动量密切相关。结果提示脑内特定部位NO含量和NRI亚单位蛋白表达的可塑性变化可能参与了大鼠慢性应激抑郁模型的发生过程，对NMDA受体一NO通路的干预将为抗抑郁药的研制和临床抑郁症的治疗提供新的思路。