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目的:探讨三丁酸甘油酯(Tributyrin,TB)对人急性白血病细胞株NB4、K562、SHI-1以及白血病原代培养细胞的增殖抑制、诱导分化、凋亡作用及其可能的作用机制。 方法:利用台盼蓝拒染法,MTT比色法、细胞形态学观察,NBT还原率,联苯胺染色法,检测细胞表面抗原CD11b、CD14、CD71表达,流式细胞仪测定AnnexinV结合力和DNA含量,DNA凝胶电泳等方法观察TB对白血病细胞K562、NB4、SHI-1及18例白血病原代培养细胞的增殖抑制、诱导分化及凋亡作用。通过Western blotting方法检测组蛋白H3乙酰化水平的改变。用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)方法测定TB作用于白血病细胞后,细胞周期蛋白依赖性激酶抑制物p21WAF1/CIP1表达量的改变。 结果:①TB可以抑制K562、NB4、SHI-1细胞的增殖及活力,呈剂量-时间依赖效应。TB0.5mM作用72h后,原代培养的白血病细胞及正常骨髓细胞存活率分别为56.3±20.7%、95.7±2.8%,两者间有显著差别(p<0.01)。TB作用后16小时,K562、NB4、SHI-1细胞阻滞于G1或/和G2期,并伴分布于S期细胞明显下降,因药物浓度及细胞株的不同而有所差异。②K562、NB4、SHI-1及原代培养的白血病细胞经TB0.5-1.0mM作用48小时后,出现典型的凋亡形态学改变。TB处理后K562、NB4、SHI-1细胞AnnexinV结合力明显上升,并可见典型的DNA梯带,提示细胞发生凋亡。③TB0.1mM/ATRA0.05uM联合作用于NB4细胞,细胞形态学及NBT还原率均提示细胞出现分化。TB0.1mM作用后SHI-1三]一酸甘油醋诱导白血病细胞增殖抑制、分化、凋亡及其机理的研究中文提要细胞形态上出现部分分化,NBT阳性率升高,细胞表面CDllb、CD14表达上调。TB 0.2mM单用及联合Al…RA 1.ouM作用于K562细胞,细胞形态学、联苯胺染色法、细胞表面CD71检测均未提示细胞出现分化。TB 0.lmM/ATRA 1.ouM联合作用于AML一Ml来源的原代细胞后,形态学可见部分分化。④TB处理Ks62、sHI一1、NB4细胞后,Wcstern blotting法可测得乙酞化组蛋白H3水平升高。TB作用2小时即有组蛋白乙酞化水平的上升,可维持24小时。⑤TB处理后Ks62、NB4、SHI一i细胞P21WA““C‘P’表达均明显上调,并具有剂量一时间依赖性。结论:①TB能抑制K562、NB4、SHI一1细胞增殖并影响细胞活力;阻滞细胞周期进程于Gl和/或GZ期。②TB能抑制白血病原代培养细胞的增殖,而对正常骨髓细胞无明显影响。③TB单用或联合ATRA可诱导K562、NB4、SHI一1及白血病原代培养细胞的分化和/或凋亡,作用因药物浓度及细胞株的不同而有所差异。④TB抑制白血病细胞增殖,诱导分化和/或凋亡作用与TB引起组蛋白高乙酞化,继而上调pZIWAF‘表达及有关。