新乡市镉污染农田固定细菌群落组成及其功能研究

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近年来,随着经济的飞速发展,我国非常多的土地都受到了严重的重金属污染,其中以镉(Cd)的污染最为严重,土壤重金属的污染会破坏土壤系统原来稳定的微生物群落结构和多样性,进而影响土壤耕作价值,因此对其进行修复已刻不容缓。近些年常用于修复被重金属污染土地的技术主要有如下三种:物理法、化学法和生物法。重金属污染土壤中的微生物群落结构非常丰富,为微生物修复污染土壤提供了重要的微生物资源。本文以镉(Cd)污染的土壤为研究对象,土壤样品采自河南省新乡市某电池厂附近三个采样点,把采集的样品带回实验室后,分别测定三种土壤样品中重金属Cd的含量、提取土壤总DNA进行高通量测序和微生物平板培养法分析土壤样品细菌群落组成。对通过可培养方法分离得到的菌株进行Cd摇瓶吸附实验,筛选出固定Cd效果较好的菌株,然后通过青菜盆栽实验对固定效果进行进一步验证,青菜品种为鸡毛菜。筛选出既能降低青菜根茎叶不同组织中Cd含量又能提高青菜生物量的高效菌株,以期为新乡市重金属污染土壤的生物修复提供菌种资源、为研究重金属污染土壤细菌群落组成和功能提供参考依据。主要研究结果如下:1.通过提取土壤总DNA并进行高通量测序,结果表明其由25门400属组成,25门分别为放线菌门(Actinomycetes)、变形菌门(Proteobacteria)和酸杆菌门(Acidobacteria)等,400属分别为硝化螺旋菌属(Nitrospira)、鞘氨醇单胞菌属(Sphingomonas)、斯科曼氏球菌属(Skermanella)等;通过传统平板培养的方法分别从新乡市三个采样点采集到的重金属污染土壤中共分离得到159株菌,通过16S rRNA测序和同源性比对显示:分离菌株由4门30属组成,4门分别为放线菌、拟杆菌、厚壁菌和变形菌门,30个属分别为芽孢杆菌属(Bacillus)、根瘤菌和节杆菌属等。高通量测序所得结果和传统平板培养方法进行比较得出,前者群落组成更为丰富。通过对高通量测序结果进行分子生态网络分析得知其关键细菌为Arthrobacter、Ferruginibacter、Flavitalea、Marmoricola、Nitrospira、Nocardioides、Lysobacter等。2.Cd摇瓶吸附实验表明Aneurinibacillus、Arthrobacter、Bacillus等11个属的30株菌具有较好的固定效果。效果验证实验表明,Agrobacterium sp.(1-3)、Ochrobactrum sp.(1-6)、Bacillus sp.(2-12)等6株高效菌株既能降低青菜(鸡毛菜)根茎叶不同组织中Cd含量又能提高青菜生物量。
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