沙芥叶片黄酮类化合物的提取、纯化及抗氧化研究

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本论文以沙芥叶片为原料,提取、分离、纯化沙芥叶片中总黄酮化合物,探讨其具有的抗氧化能力,便于今后利用及开发沙芥资源。试验的主要结果如下:(1)利用响应面软件设计,采用回流提取和超声波辅助法分别对沙芥叶片总黄酮进行了单因素试验,在单因素的基础之上利用响应面试验对沙芥叶片总黄酮的提取做出了系统的研究。结果如下:①运用响应面法优化沙芥叶片总黄酮回流提取工艺,最佳提取工艺为:乙醇浓度85%,料液比1:28 ml·g-1,提取温度85℃,回流时间2h。经验证,沙芥总黄酮提含量实测值26.5132mg·g-1,与理论值的RSD为2.3%。表明通过响应面法获得的工艺参数具有较强的可靠性、实用性。②运用响应面法优化沙芥叶片总黄酮超声提取工艺,最佳的提取条件是:乙醇浓度80%,料液比1:26 ml·g-1,超声时间42min,超声温度70℃,沙芥叶片总黄酮实际提取含量为26.0604 mg/g,理论值26.0899 mg/g,RSD为2.086%,表明试验结果准确。考虑到后续工作量大,时间短等原因,后续工作选择超声提取方法。(2)用正交设计法优化的AB-8大孔树脂分离纯化沙芥叶片总黄酮的最优工艺参数如下:最佳吸附条件:上样浓度1.96mg/m L,上样流速2.0m L/min,样液p H为5,最大上样量5BV,经验证其吸附率87.62%;最佳的洗脱条件是:乙醇浓度为80%,洗脱速度为2.0m L/min,洗脱体积达到4BV,验证结果表明其解析量为1.84 mg/g。通过测定,其回收率为83.16%,纯度从22.16%提高到64.93%,精制倍数达2.93,说明AB-8大孔吸附树脂对沙芥叶片总黄酮具有较好的纯化精制效果,该树脂有选择性好,吸附解析率高,操作简单易行且无毒害作用。(3)4种体外抗氧化体系结果表明,沙芥叶片总黄酮的粗提物和纯化物对Fe3+都具有较强的还原能力,对羟自由基、超氧阴离子和DPPH自由基均具有一定的清除作用,通过比较得出整体抗氧化能力大小顺序为:纯化物>BHT>粗提物。
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