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课题组前期研究表明,油茶蒲提取物具有抗癌、减肥降脂、降血糖、改善良性前列腺增生症等生物活性。本文重点测定比较了八种油茶蒲提取物(oiltea camellia extracts, OCE)活性物质含量及其抗氧化活性,优化了油茶蒲提取物鞣质纯化工艺,初步探究了油茶蒲鞣质对亚硝酸盐的清除作用。主要研究内容和结论如下:(1)采用分光光度法测定了八种油茶蒲提取物(浙江红花油茶、小果油茶、攸县油茶、大果红花油茶、博白大果油茶及仙居、三江、常山普通油茶)皂苷、多酚、以及黄酮类化合物含量。油茶皂苷在油茶蒲提取物含量最为丰富,平均在30%左右,其中小果油茶OCE含量最高达到50%;油茶蒲提取物酚类物质含量丰富,普通油茶OCE多酚含量明显高于其他品种,大果红花油茶OCE和攸县油茶OCE多酚含量较低;黄酮含量相对于油茶蒲提取物中其他活性成分含量较低,浙江红花油茶茶蒲提取物黄酮含量最高。(2)运用HPLC分析油茶蒲提取物多酚类特征化合物主要为没食子酸(GA)、鞣花酸(EA)和3-O-甲基鞣花酸4’-O-β-D-吡喃葡萄(MEAG),其中仙居普通油茶茶蒲提取物三种特征化合物总量最高,浙江红花油茶茶蒲提取物GA含量最高,大果红花油茶茶蒲提取物MEAG含量最高,博白大果油茶茶蒲提取物不含有这三种特征化合物。(3)采用DPPH法、FRAP法及化学发光法测定比较八种油茶蒲提取物抗氧化活性,DPPH法和FRAP法测定结果相似,普通油茶茶蒲提取物抗氧化能力高于其他品种,其中又以仙居普通油茶抗氧化活性最强(清除DPPH·IC50为22.094±0.920μg/mL, FeSO4当量为0.1872±0.0011mmol/L),浙江红花油茶和大果红花油茶抗氧化能力最弱;不同品种油茶蒲提取物清除H2O2、O2-、·OH能力远远强于抗坏血酸,和Trolox能力相当。油茶蒲多酚类化合物与其抗氧化活性之间呈显著相关性。(4)采用干酪素法测定油茶蒲鞣质含量,以常山普通油茶蒲鞣质为纯化对象,筛选出HPD100型树脂适合分离纯化油茶蒲鞣质,优化了分离纯化油茶蒲鞣质工艺条件,经过大孔树脂分离纯化后,油茶蒲鞣质纯度由16.41%升高至59.15%,得率为85%左右;经HPLC检测,纯化后MEAG和EA得到了较大程度富集,MEAG含量由2.3858±0.0035mg/g升高至11.0976±0.0056mg/g, EA含量由0.9279±0.0011mg/g升高至2.0338±0.0021mg/g。(5)在模拟人体胃液条件下,常山普通油茶蒲鞣质对亚硝酸盐清除效果略低于抗坏血酸,强于油茶蒲粗提物,0.027mg/mL油茶蒲鞣质提取液对亚硝酸盐清除率可以达到81.15%;常山普通油茶蒲鞣质对亚硝胺反应的抑制作用明显强于抗坏血酸和油茶蒲粗提物,因此,油茶蒲鞣质为一种潜在的亚硝化反应抑制剂。(6)采用香草醛-浓硫酸显色法测定油茶蒲缩合鞣质含量为272.99±5.54mg/g,占总鞣质66.85%;采用酸解HPLC法测定油茶蒲可水解鞣质含量为135.36±2.54mg/g,占总鞣质33.15%,因此,判断常山普通油茶蒲鞣质为以缩合型鞣质为主的混合型鞣质。